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IncuCyte非标记的长时间动态活细胞成像分析仪
IncuCyte:非标记的、长时间动态活细胞成像分析仪
上海典奥生物科技有限公司(Tekon Biotech (Shanghai)Ltd.)
目前,大部分的细胞检测方法采用的仍然是传统的终点法——仅仅给出最终结果,而且
往往需要标记细胞和破坏细胞。这种方法无法得到细胞在生长时的真正状态,也无法对细胞
的生长过程做出动态的监测和分析。美国 Essen公司开发了一款非标记的、长时间动态活细
胞成像分析仪——IncuCyte,用一种非侵入式的方法,记录细胞的实时生长状态。
IncuCyte 是一套用于长时间动态,非伤害式的活细胞成像分析平台。IncuCyte分为信
号采集机和控制机两部分,信号采集机可放置于培养箱中,中间放置多种规格尺寸的板、皿、
瓶及载玻片,在其下方有显微照相设备,通过显微拍照,对培养细胞进行连续的监测,并通
过连接电脑和网络进行远程控制、数据读取与分析。系统可自动集中每个时间点的图像并自
动生成动态录像。用户除了可以得到各种格式的图像或动态录像外,还可以得到由系统软件
自动依据饱和度和计数分析生成的基于图像应用的图表,以显示细胞的变化及趋势。
IncuCyte FLR 可采集相差图像和黄绿荧光图像,可显示 GFP,YFP、荧光素(Fluorescein)、
Alexa 488、nuclear dyes 等;IncuCyte EX 可以与自动化的平板和液体处理系统整合。它
们都进行了光学组件的优化,成像清晰,无传统的光晕问题。
图1:培养箱中的 IncuCyte
IncuCyte 的优势:1)培养的细胞用高清晰度 (HD)相差显微镜或荧光显微镜直接监测,
为非破坏性的监测,细胞不用染色便可以观察监测,影像效果好;2)监测过程中细胞无需
离开培养箱,不用担心培养条件的改变对细胞的影响;3)真正的长时间的动态活细胞成像,
可达数天或数月,高清晰度(HD)相差成像能消除微孔板的弯液面缺陷(meniscus artifacts),
且没有传统显微系统的光晕问题,可以在 384微孔板内监测细胞形态;4)图像处理软件自
动依据饱和度和计数分析,量化细胞增殖;5)自动输出细胞生长曲线和细胞生长录像;6)
实时监控,可改变传统的“终点法”实验方法,数据丰富,更准确、更灵活;7)高通量,
可同时监测 6 块标准规格的细胞培养板/皿/瓶,细胞在 384 微孔板内实验,可以减少宝贵的
药品消耗;8)支持超过 200 种的标准培养容器,无需特殊的培养容器,节约后期实验成本;
9)可远程监控,进行数据读取和分析,无需反复出入细胞房,避免了潜在的污染隐患及人
工出入观测之麻烦。
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图2:IncuCyte 内部结构,支持超过 200 种的标准培养容器
图3:IncuCyte 记录的细胞的相差图像和增殖曲线
图3是 IncuCyte 记录的细胞增殖的相差图像和增殖曲线。左侧图像是在同一视野内间
隔 12 小时拍摄的 CHO 细胞的相差图像,图像可以 24 小时连续生成,而无需将细胞移出培养
箱。右侧的增殖曲线是依据间隔 3 小时的图像生成的,由软件自动将图像数据转换成定量的
饱和度 vs.时间的数据,生成动态的增殖曲线。最后图像会被导出成单独的 JPEG 文件或视
频。
IncuCyte 软件功能:通过联网的软件,用户可以在任何一台联网的计算机上操控仪器,
而无需反复拿进拿出标本及出入细胞房,这使 IncuCyte 成为了一个“虚拟的培养箱”。用户
可以在软件的操作界面上定义耗材的类型、拍摄的时间
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