液相色谱-质谱联用LC-MS使用指引及注意事项1开机.PDFVIP

液相色谱-质谱联用（LC-MS ）使用指南及注意事项 高洁 生物站 A308 仪器型号: 岛津 LCMS-2020 1. 开机 1.1 开机前准备  确认氮气畅通，液氮罐 GAS 出口压力表指针在0.7~0.8MPa 之间。压力不够时， 将其对面的增压阀拧大，使压力达到要求，若压力还不够，说明需要更换液氮。  确认流动相溶剂瓶内液体够用 （流动相A-娃哈哈小瓶装纯净水，B 为乙腈， 分别加千分之零点三五的 HPLC 级三氟乙酸），液面要没过吸滤头。  打开 UV 检测器箱门，将三通与质谱分流接头连接。 1.2 开机过程 开机顺序为 1 2 3 4 5 6，关机顺序为 6 5 4 3 2 1。 1.3 打开电脑之后  打开分析程序。  将 MS 配置到程序中。 方法如下： Main→System Configuration→LCMS→上方蓝箭头→OK 听到“滴”一声后，页面显示液相与质谱绿色 ready 状态，说明 LC 与 MS均与程序连接 良好。 2. 进样 2.1 样品准备  浓度：0.1 mg/ml 左右  溶剂：流动相（乙腈 水 甲醇），若以上均不溶，用少量 DMSO 溶解再稀释到以 上溶剂中  过滤膜！！  样品瓶要确保无尘 2.2 仪器准备  打开之前设定好的 Method File→Download （目的是将仪器参数从程序配置到仪器）  如果刚刚开机的话，各个部件还未预热，需要把各个部件打开。 打开顺序为：1234567 （7 打开后 8 和 9 自动打开） 1）如果方法中的分子量扫描范围不是你需要的，重新设置：  在下图中，Scan （+ ）Scan （- ）分别为正负离子扫描设置。  扫描速度=扫描范围 / 扫描周期，扫描速度在 1000u/second 左右比较好，所以改变扫 描范围之后，要相应地改变扫描周期，使扫描速度在 1000 左右。  扫描范围为 m/z 50-2000 ，一般设置 100 以上起始，因为溶剂中 100 以下小分子杂质较 多，终止分子量一般为目标分子量的二倍稍高。 2 ）LC 洗脱程序设置，设置方法与 HPLC 相似。(一般化合物都可以使用宋志建的 fast 方法， 需要修改的可以询问王怀民，高洁) 。 3 ）UV 检测器波长设置。根据自己化合物的基团的设置。 4 ）全部设置完毕后，  单击 Start Single Run，在弹出的对话框中修改Data Method ，命名为你自己的样品名。  输入样品架号（Tray name，左边很多排的为 1 号架，右边只有一排的为 0 号架）  样品号（Vial# ，放置在样品架的几号孔中）  进样量（Inject Volume ，一般为 1-10 μl，根据样品浓度自行决定）  单击 OK 3 ．进样完毕 日常进样完毕后，要关闭6 和 8，注意 9 要保持开启状态 3. 关机 每晚九点开始冲柱，最后进样完毕的人通知高洁。 冲柱方法： 将 UV 检测器内的三通上的 MS 分流接头拆下，盖好丝堵。 顺次关闭 6、5、4 、3，温度降到室温后，打开雾化室，擦洗，顺次关闭2 、1，钢针堵上DL 入口。 将 MS 从程序中脱离，Main→System Configuration→LCMS→下方红箭头→OK 之后在 Data Acquisition 页面，打开方法路径 C:\LabSolutions\method\Wash\SHUT DOWN.lcm Start Single Run 页面 vial# ：-1 tray name ：1 inject volume ：0 Data File 路径 C:\LabSolutions\DATA\Wash\washxxx