分光光度测定方法04.pptVIP

一、普通分光光度法 二、示差分光光度法 一、吸收曲线绘制 一、吸收曲线绘制 1、标准曲线法（单组分测定） A-C 标准曲线绘制 一、普通分光光度法 2、比较法（单组分测定） 用一个已知浓度的标准溶液CS，测得其吸光度AS,在一定条件下，测得其吸光度AS，然后在相同条件下，测得试液CX的吸光度AX。 试液，标准溶液完全符合朗伯—比耳定律 则有： AS＝ εb CS ： AX ＝ εb CX 所以： CX = AX/AS· CS 方法要求： CX与 CS 浓度应接近。 一、普通分光光度法 一、普通分光光度法 例题；为测定含A和B两种有色物质中A和B的浓度，先以纯A物质作工作曲线，求得A在λ1和λ2时，εa1=4800，εa2=700；再以纯B物质作工作曲线，求得εb1=800， εb2=4200.对试液进行测定，得A1=0.580，A2=1.10。 求试液中A和B的浓度。（测定均用1cm比色皿） 例方程 Aλ1= εa1·b·Ca ＋ εb1·b·Cb Aλ2= εa2·b·Ca ＋ εb2·b·Cb 代入方程 0.580 = 4800Ca ＋ 800 Cb 1.10 = 700Ca ＋ 4200 Cb 解联立方程 得 Ca=7.94×10-5mol/L Cb=2.48×10-4mol/L 二、示差分光光度法（示差法） 二、示差分光光度法（示差法） 示差法标尺扩展原理： 请选择内容： * * 第四节 分光光度测定方法 模块一 分光光度分析法 A 吸光度 λ nm 波长λ与吸光度A数据表 A 吸光度 λ nm A 波长λ 最大吸收波长λmax Ax 吸光度 A 0.04 0.03 0.02 0.01 0.00 浓度C 待测液 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 容积 吸光度A与浓度C数据表 C=0.01mol/L 一、普通分光光度法 浓度C 吸光度A Ax ---------------------------- Cx 0.0 2.多组分的同时测定 ⑴ 若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。 ⑵ 若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。 Aλ1= εaλ1·b·ca ＋ εbλ1·b·cb Aλ2= εaλ2·b·ca ＋ εbλ2·b·cb 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需采用示差法。即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。 设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs cx)。则： Ax= εb cx As = εb cs ΔA＝Ax －As =εb(cx － cs ）=εbΔc 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔA 。 示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx ： cx = cs + Δc 普通法： cs的T=10%；cx的T=5% 示差法： cs 做参比，调T=100% 则： cx的T=50% ；标尺扩展10倍