足月妊娠羊水中组织因子的测定及临床分析.ppt

马海梅* 张会英* 刘燕儒# 张岩# 北京积水潭医院检验科*妇产科# ;摘要 目的 检测正常足月妊娠羊水中是否存在组织因子(tissue factor,TF)这一凝血反应启动因子.方法 用ELISA方法分别测定正常足月妊娠(16例)血浆、羊水、羊水上清液及羊水沉渣中TF抗原水平。;结果 正常足月妊娠血浆、羊水、羊水上清液、羊水沉渣中TF抗原水平分别为31±9 ng/l、404±186 ng/l、348±177 ng/l、1360±639ng/l,三种不同成分的羊水TF抗原水平与血浆比较，差异均有显著性（P0.01）,尤其羊水沉渣与血浆比较,差异有极显著性(P0.001).羊水沉渣中TF抗原水平与未离心羊水、羊水上清液比较，差异也有显著性（P0.01）。 ;结论 正常足月妊娠羊水中有大量的TF，羊水有形成分中TF抗原水平最高，羊水中的TF可能是羊水栓塞引发DIC的启动因子。 ; 弥漫性血管内凝血（DIC）是羊水栓塞的主要临床症状之一，病死率高，发病机制不清。本研究的目的是检验足月妊娠羊水中是否存在组织因子（Tissue Factor,TF）,并探讨TF在羊水栓塞凝血功能改变中的作用.目前国内尚无这方面的报道. ;研究对象 选择2001年10-12月在我院妇产科住院择期剖宫产分娩的孕妇16例，均为正常足月妊娠妇女，无内、外科合并症，无妊高征及凝血障碍等并发症，平均年龄（29.6+4.2)岁，平均孕周（39.2+1.2）周。 ;实验方法 1.标本收集 1.1 血浆：孕妇于术前空腹抽取肘静脉血3ml，3.8%枸橼酸钠抗凝,立即分离血浆(3000r/min离心10min ). 1.2 羊水:手术中抽取无血液污染的羊水约2ml.二者均置-80℃ 冰箱保存待测.;3.方法:羊水分成两份各1ml,取其中一份羊水2000r/min 离心10min,分离出上清液和沉渣标本.应用ELISA方法(按试剂说明书)定量检测血浆及羊水\羊水上清液\羊水沉渣中TF的含量. ;结果 ;1. 正常足月妊娠妇女血浆和羊水中 TF抗原水平比较 正常足月妊娠妇女血浆TF水平为31.0+8.8pg/ml,羊水TF抗原水平为403.6+186.2 pg/ml,羊水上清液TF抗原水平为348.4+176.6pg/ml,后二者与血浆比较差异有显著性(p0.01).羊水沉渣中TF抗原水平为1359.8+638.6pg/ml,与血浆比较差异有显著性(p0.01).见表1. ; 注:* 与血浆比较 p0.01,** 与血浆比较，p0.01；# 与羊水比较，P0.05;# 与羊水比较, p0.01;@与羊水羊水上清液比较 p0.01 ;;2. 羊水\羊水上清液\羊水沉渣中的TF抗原水平比较 羊水上清液与未离心羊水内TF抗原水平比较差异无显著性(p0.05),而羊水沉渣TF抗原水平却远远大于未离心羊水及离心羊水上清液,差异均有显著性(p0.01)(见表1). ;讨论;凝血过程是一系列蛋白质有限水解的过程,一旦开始,各个凝血因子便一个激活另一个,形成瀑布式反应链.组织因子TF即是这一瀑布式反应链中外源性途径的启动因子. ; TF分子量为40-46Kda ,为一磷脂糖蛋白,是丝氨酸蛋白酶凝血因子VII/VIIa的跨膜细胞表面受体.TF广泛存在于血管外组织中,脑、肺、肾、胎盘组织内特别丰富。近年来研究显示，TF mRNA主要表达在血管外膜、器官被膜和黏膜及皮肤表皮[1-4]，子宫内膜基质细胞[5]及正常足月妊娠的合体滋养细胞质膜亦强烈表达TF[6]，而未受损的内皮和外周血细胞基本上无TF表达。 ; TF活化不需要蛋白水解，但必须膜联。TF细胞外区即是与FVII/FVIIa结合并激活凝血的部位[7]。TF一旦暴露于血液中，立即与FVIIa结合，形成TF/FVIIIa复合物。在凝血过程第一阶段TF/FVIIIa复合物在Ca++作用下，不但能从外源性途径激活FX成Fxa，还能激活FIX成FIXa，启动内源性凝血反应，形成凝血酶原酶，继而引发凝血蛋白的有序活化。输注重组TF可引发DIC已在动物模型中成功验证。[8] ; 本研究发现足月妊娠羊水中含有大量TF抗原，特别在羊水沉渣中TF抗原水平很高，几乎为未离心羊水及离心羊水上清液的3-4倍，与文献报道一致[9]。依据前面的分析，这一结果提示羊水中TF可能存在于羊水的有形成分，如胎儿皮肤表皮脱屑及胎儿呼吸道、消化道、泌尿道黏膜上皮脱落细胞中。; 本观察还发现足月妊娠血浆TF抗原水平很低。因此推论，一旦足量尤其含大量有形成分的羊水进入孕产妇血液循环中，TF引发凝血障碍及血液动力学改变将成为可能。这恰恰可以解释有羊水栓塞临