蛋白质分离介质的选择-西安交大保赛生物技术股份有限公司.PDFVIP

蛋白质分离介质的选择 （二、配基及基质的选择） 蛋白质分离介质选择要同时考虑两方面，一是配基，也就是选择色谱模式；二是选 择基质，包括基质的种类和排阻极限的选择。 根据目标产品与杂质的性质差异选择介质是介质选择的主要依据。选择了介质也就 是选择了分离模式。 目标产品与杂质在分子大小、等电点 pI 、不失活或可逆失活条件下的疏水性、与亲 和配基的作用四种性质上的差异是介质选择的主要依据之一。产品与杂质某方面的性质 有大的差异，就可用来做为分离方法选择的依据。目标产品与杂质分子大小差异大可用 凝胶色谱分离；等电点 pI 差异大可用离子交换色谱分离；不失活或可逆失活条件下的 疏水性差异大可用疏水色谱分离；与某个亲和配基有特异作用的可用亲和色谱分离。 在凝胶色谱、离子交换、疏水和反相、亲和类色谱中，反相色谱一般容易使样品失 活，常用于定性、定量分析和氨基酸序列分析，不太用于制备；其他的色谱方法，只要 条件选择合适，都可以得到高的活性回收率，可以用于制备分离。 基质主要有 3 大类：聚多糖，如交联琼脂糖、葡聚糖基质；硅胶和多孔玻璃；