[生物学]原核生物的基因调控.ppt

第14章 原核生物基因的表达及其调控 生物体的每个活细胞都含有相同的一整套基因。 基因表达具有高度的时空专一化：如肌红蛋白基因（肌细胞）。 基因表达的调控：生物有机体对其基因表达的时空程序、表达速率等所进行的调节和控制。 本底水平表达：调控处于关闭状态，只翻译极少量的蛋白质。 概 述 第一节 原核生物基因的转录和翻译 原核生物的DNA： 单个裸露的DNA 不编码占5% 转录和翻译同一时间、地点进行 转录水平调控为主 ，兼有翻译水平调控 第二节 大肠杆菌乳糖操纵子的正负调控 一、操纵子与操纵子模型 操纵子学说/操纵子模型： F.Jacob、 J.Mond（1960）E.coli lac operon( 1965诺贝尔医学生理学奖) 操纵子：核酸分子上调控基因转录活性的基本单元，由结构基因、操作子（O）和启动子（P）组成。 转录、翻译、合成蛋白 结合调节蛋白 结合RNA聚合酶 （2）乳糖代谢系统的基因组成 操纵子（operon）： i）结构基因（structural genes） ii）控制区 b. 组成型突变（constitutive mutants） （3）操纵子模型（Operon Model） ①操纵子模型对乳糖诱导效应的解释 ii）操纵子的组分 iii）操纵子的工作过程 iv）组成型突变 动画演示 ②对模型的遗传学验证 ii）PaJaMo实验验证 b. 实验过程 实验2： 实验3 （4）操纵子模型的意义 （5）阻遏物的分离和鉴定 放射性标记的阻遏物能与野生型O区结合 放射性标记的阻遏物不能与突变型O区结合 ③Lac 阻遏物的空间结构 ④阻遏物与DNA的结合 ii）X-ray分析 iii）DNA测序分析 2. 乳糖操纵子的正调控（positive control） （1）正调控因子（positive regulator） （3）CAP与DNA的结合 ②结合形式 ③结合处DNA的保守序列—回文顺序 第三节 其他类型的操纵子 一、具有双启动子的半乳糖操纵子 半乳糖（gal)操纵子组成：2个互相重叠的启动子gal P1 和gal P2 、3个操作子（CAP位点、2个阻遏蛋白位点(galOe、galOi）、3个结构基因） gal P1 依赖cAMP-CAP 转录始于S1 gal P2 阻遏蛋白调节开启 转录始于S2 三、细菌的色氨酸代谢的调控 1. 色氨酸合成代谢的基因和酶类 2. 色氨酸合成的生化途径 3. 色氨酸操纵子（trp operon） 4. 色氨酸操纵子的调节模型 动画演示 5. 色氨酸操纵子的衰减（attenuation）调节 （2）衰减原理 ② 茎环结构（hairpin structure） 3-4区配对形成类似与内终止子的结构。 ③ 茎环变换 ④ 连续的色氨酸密码和终止密码 当细胞中色氨酸水平很低时 当色氨酸充足时： 动画演示 三、其他操纵子的衰减现象性 一、 λ噬菌体的基因组及早、晚期转录 一）． 裂解的级联调节 λ噬菌体长48502nt 共61个基因，其中32个较为重要 溶原化周期 (LYSOGENIC ) 裂解周期(LYTIC) ?噬菌体的早，晚期转录 二．反终止作用 第二节 溶原化途径的维持 一、CI蛋白功能 清晰的噬菌斑（Clear plaquea） RM：repressor maintenance 二．CI蛋白的结构 分子量为27KDa，具有两个功能区 (1) N端功能区，1~92aa，操纵基因结合区; (2) C端功能区,132～236aa，负责形成二聚体。 CⅠ蛋白 的结构 UV可激活Rec蛋白，活化的Rec蛋白可剪切CⅠ蛋白 CⅠ蛋白的N端含有5个?螺旋,第2和第3个?螺旋形成HTH(螺旋转角螺旋) CⅠ蛋白二聚体N端的HTH和DNA结合，螺旋3位于DNA的大沟 CⅠ蛋白与DNA结合的信号 螺旋2上具有正调控区，此区靠近RNA聚合酶及DNA上的磷酸化位点 CⅠ蛋白的合成是通过CⅡ蛋白激活和RNA聚合酶在PRE上的转录 三.阻遏物与DNA的结合及调机制 螺旋转角螺旋(helix-turn-helix,HTH) 识别螺旋（recognition helix） 四.反义RNA调控 1.PAQ 抑制 Q 基因 表达 2.P RE 抑制 cro 基因 表达 五.反向调节 游离λ噬菌体 P L启动子转录的RNA是否会产生 sib 位点？ 游离λ噬菌体 P I启动子转录的