聚合物PLGA-PEG-PLGA的合成及表征-济南岱罡生物工程有限.PDFVIP

2 聚合物 PLGA-PEG-PLGA 的合成及表征 鉴于聚合物作为药物载体在医药中应用的优势，各种新型两亲共聚物被研究 合成，其中以 GA、LA 和 PEG 为原料合成的 ABA 型、BAB 型及 AB 型嵌段共聚 物被广泛研究（其中 A 代表 PEG ，B 代表 PLGA ）。PLGA 和 PEG 是常见的医用、 药用材料，且均被食品及药物管理局（FDA ）批准作为医用材料。PLGA 段是疏水 的聚酯，可在体内降解为乳酸和羟基乙酸，参与人体代谢，被广泛用于药物缓释 胶囊材料、外科手术缝线、骨科内固定材料等。通过调节 GA 与 LA 的用料比例， 可以调节 PLAG 段的亲疏水性和降解速率。PEG 段具有亲水性，独特的生物相容 性，无毒性，无抗原性和免疫原性，常用于修饰疏水性药物，改变药物在体内的 分布。除此之外，这种类型的共聚物在水溶液中可自组装成为胶束，且具有温度 敏感性。 合成 PLGA-PEG-PLGA 的路线有两种[11] ：缩合共聚法和开环聚合法。缩合共 聚法是用乳酸、羟基乙酸先行聚合生成低聚 PLGA ，将其作为B 段，然后将 PLGA 与 PEG （A 段）按比例反应生成 PLGA-PEG-PLGA 。此法简单，易操作，但得到 的共聚物产率低、热敏性小。开环聚合法则利用丙交酯、乙交酯和PEG 按比例在 一定条件下聚合得到嵌段聚合物。该法需要先利用乳酸和羟基乙酸合成丙交酯和 乙交酯，成本高，操作复杂，但该方法产率高，聚合物理化性质理想，重现性好。 2.1 材料和仪器 2.1.1 材料 D, L-丙交酯、乙交酯（济南岱罡生物技术有限公司） PEG1000 （天津天泰精细化学品有限公司） PEG1500 （成都科龙化工试剂厂） 辛酸亚锡（美国 Sigma 试剂公司） 乙酸乙酯（重庆川东化工有限公司） 氯仿（重庆川东化工有限公司） 纯氮（重庆创亿气体有限公司，纯度：99.99% ） 蒸馏水（minipore 纯水机） 2.1.2 仪器 603 精密恒温油浴（重庆银河试验仪器有限公司） 高速搅拌器 D90-2F (杭州仪表电机厂) 电热恒温水浴锅（北京长风仪器仪表公司） 4 精密电子天平（上海恒平科学仪器有限公司） 冷冻干燥机（北京德天佑科技发展有限公司） 超声清洗机（无锡上佳生物科技有限公司） AVANCE-500 超导核磁共振仪（德国 BRUKER 公司） 傅里叶变换红外光谱仪（PerkinElmer 公司） 接触角测量仪（台湾翰光高科技股份有限公司） 2.2 实验方法 2.2.1 PLGA-PEG-PLGA 的制备 ① 丙交酯的纯化 重结晶法：将购买的丙交酯放入烧杯，加入体积大约是丙交酯体积 3 倍的乙 酸乙酯，水浴加热使丙交酯完全溶解，然后将丙交酯-乙酸乙酯溶液置于室温冷却 后，再放入冰箱继续冷却过夜。待丙交酯晶体析出停止后，抽滤、真空干燥，放 入干燥器，备用。重结晶 3 次。因乙交酯购买保存时间短，无需纯化。 ② PLGA-PEG-PLGA 的合成 开环聚合法[12] ：在氮气保护下，将 PEG 加入三颈瓶中。160℃油浴，搅拌干 燥 2h 。再加入丙交酯（5.673g ）和乙交酯(1.74g)，继续搅拌 30min 后，停止搅拌， 并加入 2 滴辛酸亚锡，150℃氮气保护下反应 8h，得到粗产品。为考察不同组成对 聚合物性质的影响，设计两组样品，样品 A ：PEG1000 ：PEG1500 为 1：1 （质量 比），共 3g ；样品B ：仅采用PEG1000(3g) 。 2.2.2 PLGA-PEG-PLGA 的纯化 将得到的粗产品加入蒸馏水，低温下搅拌待其充分溶解后，将聚合物水溶液 置 80℃水浴中使其完全沉淀，去除上清液中含有未反应的单体及低分子物质。溶 解-沉淀过程重复三次。将最后一次纯化得到的沉淀物冷冻干燥，于-20℃低温保存 备用。 2.3 表征 2.3.1 IR 测定 将样品 A 溶于氯仿，制备 15mg/mL 样品氯仿溶液。取压制好的 KBr 片，分别 将氯仿及溶有样品的氯仿滴于 KBr 片上。红外灯下干燥后，前者作为空白片，在 Spectrum GX 傅立叶红外光谱仪上测定样品的化学结构。 2.3.2 1H-NMR 测定 以氘代氯