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[理学]山东大学生物化学精品课程 08-2 the enzymology of DNA replication
生物化学
Chapter 8 DNA的生物合成
Chapter 8 DNA的生物合成
Biosythesis of DNA
Biosythesis of DNA
1.5 DNA的复制酶体系及其作用机理
The Enzymology
of DNA Replication
DNA polymerase I (from
E.coli cells, consisting a
single polypeptide chain)
was the first DNA
polymerase purified and
characterized (by Arthur
Kornberg in 1955)
1.5.1 DNA聚合酶
(以DNA为模板的DNA聚合酶)
模板链结合部位 识别并结合模板
引物链结合部位 识别并结合引物
酶活性部位
的复杂性 dNTP专一性结合部位 识别并结合4种dNTP
多种酶活性催化部位 三种酶活性
1.5.1 DNA聚合酶
DNA polymerase I 同时具有多种活性:
1.The polymerase is able to
add dNTP to the 3’-hydroxyl
group of a preexisting
primer strand ( 5’→3’
polymerizing activity);
• DNA polymerase I
catalyzes the nucleophilic
attack by the 3’-OH
1.5.1 DNA聚合酶
3’5’外切酶位点
P414
1.5.1 DNA聚合酶
DNA polymerase I 同时具有多种活性:
2. DNA polymerase I has a
separate intrinsic 3’→5’
exonuclease activity, found to
be used for correcting mistakes
(proofreading) in newly
synthesized DNA chains;
1.5.1 DNA聚合酶
3’→5’ exonuclease activity
Proof reading activity is slow compared to polymerizing
activity, but the stalling of DNAP I after insertion of an
incorrect base allows the proofreading activity to catch
up with the polymerizing activity and remove the
incorrect base.
1.5.1 DNA聚合酶
DNA polymerase I 同时具有多种活性:
1. The polymerase is able to add dNTP to the 3’-h
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