[理学]第五章色谱定性定量分析.ppt

最佳线速和最小板高可以通过H = A + B / u + C u进行微分后求得。 上图的虚线是速率理论中各因素对板高的影响。比较各条虚线可知，当u值较小是，分子扩散项B/u将成为影响色谱峰扩张的主要因素，此时，宜采用相对分子质量较大的载气（N2、Ar），以使组分在载气中有较小的扩散系数。另一方面，当u较大时传质项Cu将是主要控制因素。此时宜采用相对分子质量较小，具有较大扩散系数的载气（H2、He），以改善气相传质。当然，还须考虑与所用的检测器相适应。 二、柱温的选择 柱温是一个重要的色谱操作参数，它直接影响分离效能和分析速度。 柱温不能高于固定液的最高使用温度，否则会造成固定液大量挥发流失。某些固定液有最低操作温度。一般地说，操作温度至少必须高于固定液的熔点，以使其有效地发挥作用。 降低柱温可使色谱柱的选择性增大，但升高柱温可以缩短分析时间，并且可以改善气相和液相的传质速率，有利于提高效能。所以，这两方面的情况均需考虑。 在实际工作中，一般根据试样的沸点选择柱温、固定液用量及载体的种类。对于宽沸程混合物，一般采用程序升温法进行。 三、柱长和内径的选择 由于分离度正比于柱长的平方根，所以增加柱长对分离是有利的。但增加柱长会使各组分的保留时间增加，延长分析时间。因此，在满足一定分离度的条件下，应尽可能使用较短的柱子。 增加色谱柱的内径，可以增加分离的样品量，但由于纵向扩散路径的增加，会使柱效降低。 四、载体的选择 又范氏速率理论方程式可知，载体的粒度直接影响涡流扩散和气相传质阻力，间接地影响液相传质阻力。随着载体粒度的减小，柱效将明显提高，但粒度过细，阻力将明显增加，使柱压降增大，对操作带来不便。因此，一般根据柱径选择载体的粒度，保持载体的直径约为柱内径是1/20 ~ 1/25为宜。 速率理论方程式A项中的?是反映载体填充不均匀性参数，降低?，即载体粒度均匀，形状规则，有利于提高柱效。 五、进样时间和进样量 进样速度必须很快，因为当进样时间太长时，试样原始宽度将变大，色谱峰半峰宽随之边宽，有时甚至使峰变形。一般地，进样时间应在1s以内。 色谱柱有效分离试样量，随柱内径、柱长及固定液用量不同而异。柱内径大，固定液用量高，可适当增加试样量。但进样量过大，会造成色谱柱超负荷，柱效急剧下降，峰形变宽，保留时间改变。理论上允许的最大进样量是使下降的塔板数不超过10%。总之，最大允许的进样量，应控制在使峰面积和峰高与进样量呈线性关系的范围内。 三、PTGC和IGC方法的比较 参数 LGC PTGC 样品沸点范围 ＜100％ 100％－400％ 进样量 　　　＜1－5μl ≤10μl 进样速度 对第一个色谱峰，进样时间应小于0.05Wh/2(半峰宽) ? 进样方式 直接进样 分流进样 柱上进样 直接进样,分流－不分流进样,柱上进样,多维柱切换进样,顶空和裂解器进样 载气纯度 无严格要求 需高纯载气 峰容量 ≤10个组分 ＞10个组分 固定相选择 可广泛选用固定相 只能选用耐高温、低流失固定相 对色谱峰的检测 对保留时间长的组分检测较不灵敏 随温度速率增加,可改进对保留时间长的高沸点组分的检测灵敏度 载气流速控制方式 恒压 恒流(使用稳流阀) 分析速度 慢 快 第七章：程序升温气相色谱法 第二节： PTGC的基本原理 一、保留温度 PTGC种样品从色谱柱中洗脱出的温度，称为保留温度。用TR表示。 当初始温度为T0,升温速度为r时： TR= T0+r tr 其中tr为温度T0升温至TR所用的时间。则： tr = （TR- T0）/r 在程序升温色谱中TR也遵循碳数规律和沸点规律 第七章：程序升温气相色谱法 由上式也可求出程序升温气相色谱中的组分保留体积： F是室温下柱出口的载气体积流速 二、初期冻结 在程序升温气相色谱分析中，进样后由于柱的起始温度比较低，便可对低沸点物质分离，其余大部分组分在较低柱温下，因为其饱和蒸气压较低，大都溶解在固定相上，在柱中移动的速度极慢，几乎停留在柱入口处不移动，既凝聚在柱头，称为初期冻结。 第七章：程序升温气相色谱法 组分在柱中的移动状况： 组分的蒸发焓为 由Clapeyron-Classius方程可知： 当蒸气压增加一倍时， 根据Trouton定律： 第七章：程序升温气相色谱法 第七章：程序升温气相色谱法 对于沸点为500K的物质： 上式表明，当温度升高约30°C，溶质在气相中的蒸气压增加一倍，当温度升至TR-30°C时，组分移动到