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[理学]第五讲-1 中药含量测定方法-n2
六 紫外-可见分光光度法
(Ultraviolet and Visible Spectrophotometry)
定义 根据被测物质在紫外-可见光的特定波长处或一定波长范围内的吸
光度,对该物质进行定性定量分析的方法称紫外-可见分光光法。
紫外分光光计光路示意图
紫外分光光计光路示意图
紫外吸收光谱图
紫外分光光度计工作原理 紫外吸收光谱图
紫外吸收光谱图
特点 本法操作简便,灵敏度高,常用于中成药含测。但本法不具
分离功能,常用于总成分的测定。
定量分析的理论基础 朗伯比尔定律
A = K C L
A为吸收度
K为吸收系数
C为溶液浓度
L为溶液厚度
药典收载了三种测定方法
1.吸收系数法 仅用于UV,不需对照品。
2.对照品比较法 主要用于Vis,需用对照品。
3.标准曲线法 主要用于Vis,需用对照品。
(原计算分光光度法取消)
1、吸收系数法
1).原理 1%
∵A = E C L
∵A = E C L
1cm
A
∴C
∴C
1%
1%
E L
E L
1cm
1cm
1%
C 为供试液浓度(g/100ml)
A 为供试液测得的吸收度
E 为被测物质的百分吸收系数(药典给出)
L 为比色皿(液层)厚度(1cm)
将求得的C值(供试液浓度)、样品溶液的稀释倍数和取样量或平均片
(丸)重代入公式计算,即可求出药品中被测成分的含量。
2).特点 不需对照品随行测定,操作简便,仅用于紫外分光光度法。
故需严格校正仪器,规范实验条件,做好前处理工作。
3).实例
(1)前列舒丸(水蜜丸)中牡丹皮的含量测定
取本品切碎,取2g,精密称定(2.135g);用水蒸气蒸馏,收集馏出
液约450ml,置 500ml量瓶中,加水稀释至刻度,照分光光度法(附录Ⅴ
A)在274nm 的波长处测定吸收度(A 0.333),按丹皮酚(C H O )吸
9 10 3
1%
1%
收系数(E )为862 计算,即得。本品含牡丹皮按丹皮酚(C H O )
1cm
1cm 9 10 3
计,每1g不得少于0.53mg
(1) 供试液浓度的计算
(1) 供试液浓度的计算
A
C供
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