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[理学]第五讲-1 中药含量测定方法-n2

六 紫外-可见分光光度法 (Ultraviolet and Visible Spectrophotometry) 定义 根据被测物质在紫外-可见光的特定波长处或一定波长范围内的吸 光度,对该物质进行定性定量分析的方法称紫外-可见分光光法。 紫外分光光计光路示意图 紫外分光光计光路示意图 紫外吸收光谱图 紫外分光光度计工作原理 紫外吸收光谱图 紫外吸收光谱图 特点 本法操作简便,灵敏度高,常用于中成药含测。但本法不具 分离功能,常用于总成分的测定。 定量分析的理论基础 朗伯比尔定律 A = K C L A为吸收度 K为吸收系数 C为溶液浓度 L为溶液厚度 药典收载了三种测定方法 1.吸收系数法 仅用于UV,不需对照品。 2.对照品比较法 主要用于Vis,需用对照品。 3.标准曲线法 主要用于Vis,需用对照品。 (原计算分光光度法取消) 1、吸收系数法 1).原理 1% ∵A = E C L ∵A = E C L 1cm A ∴C ∴C 1% 1% E L E L 1cm 1cm 1% C 为供试液浓度(g/100ml) A 为供试液测得的吸收度 E 为被测物质的百分吸收系数(药典给出) L 为比色皿(液层)厚度(1cm) 将求得的C值(供试液浓度)、样品溶液的稀释倍数和取样量或平均片 (丸)重代入公式计算,即可求出药品中被测成分的含量。 2).特点 不需对照品随行测定,操作简便,仅用于紫外分光光度法。 故需严格校正仪器,规范实验条件,做好前处理工作。 3).实例 (1)前列舒丸(水蜜丸)中牡丹皮的含量测定 取本品切碎,取2g,精密称定(2.135g);用水蒸气蒸馏,收集馏出 液约450ml,置 500ml量瓶中,加水稀释至刻度,照分光光度法(附录Ⅴ A)在274nm 的波长处测定吸收度(A 0.333),按丹皮酚(C H O )吸 9 10 3 1% 1% 收系数(E )为862 计算,即得。本品含牡丹皮按丹皮酚(C H O ) 1cm 1cm 9 10 3 计,每1g不得少于0.53mg (1) 供试液浓度的计算 (1) 供试液浓度的计算 A C供

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