[理学]第八章 吸光光度法.pptVIP

第八章 吸光光度法 概述 化学分析与仪器分析方法比较 化学分析：以化学反应为基础的分析方法，适用于常量组分的测定(1 %), 相对误差Er : 0.1%～0.2 % 仪器分析：测量试样溶液的光学性质、电学性质等物理或物理化学性质来求出待测组分含量的分析方法，适用于微量组分的测定(1 %), 相对误差Er : 1 %～5 % 第八章 吸光光度法 仪器分析方法分类 1.光学分析法: 利用物质的光学性质. 2.电化学分析法: 利用物质的电学及电化学性质 3.色谱法: 用以分离、分析多组分混合物的 物理及物理化学分析方法 4.质谱法、热分析法、放射化学法等 第八章 吸光光度法 光学分析法分为: 光谱分析法和非光谱分析法。 光谱分析法是指在光的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。 吸收光谱分析 发射光谱分析 分子光谱分析 原子光谱分析 第八章 吸光光度法 吸光光度法(Absorption Photometry) 依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法。 主要有: ★ (1) 可见吸光光度法 ★ (2)紫外吸光光度法 (3)红外光谱法 第八章 吸光光度法 特点: ☆灵敏度高： 测定下限可达10-5~10-6 mol·L- 1 ☆准确度高： 相对误差 2～5 ％ ☆操作简便快速 第八章 吸光光度法 第一节 吸光光度法基本原理 第二节 光度计及其基本部件 第三节 吸光光度法分析条件的选择 第四节 吸光光度法的应用 第八章 吸光光度法 第一节 吸光光度法基本原理 第八章 吸光光度法 一、物质对光的选择性吸收 （一）光的基本性质1. 光的基本性质 光是一种电磁波，具有波粒二象性。 2.电磁波谱 第八章 吸光光度法 3. 可见光和互补光 (1)可见光:指人的眼睛所能感觉到的光。 (2)互补光:将两种适当颜色的光按一定的强度比例混合，如果能形成白光，这两种光称为互补光。 图 光的互补色示意图(?/nm) 第八章 吸光光度法 （二）物质对光的选择性吸收及吸收曲线 1. 物质对光的选择性吸收 一种物质呈现何种颜色，是与光的组成和物质本身的结构有关的。 当一束光照射到某物质或其溶液时，组成该物质的分子、原子或离子与光子发生“碰撞”，光子的能量被分子、原子所吸收，粒子由基态跃迁到激发态。 第八章 吸光光度法 ?E = E2 - E1 = h ? 不同结构的分子对不同波长光的吸收程度不同； 例 如：CuSO4溶液 第八章 吸光光度法 2.吸收曲线 将不同波长的光透过某一固定浓度和厚度的有色溶液，测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标做图，即可得吸收曲线。 吸收峰对应的波长为最大吸收波长?max 。 第八章 吸光光度法 吸收曲线的讨论： （1）同一种物质对不同波长的 光的吸光度不同。 （2）不同浓度的同一种物质， 其吸收曲线形状相似λmax不变。 而对于不同物质，它们的吸收 曲线形状和λmax则不同. （3）不同浓度的同一种物质， 在某一定波长下吸光度 A 有 差异，在λmax处吸光度A 的差异最大。 第八章 吸光光度法 不同物质吸收光谱的形状以及?max 不同 ——定性分析的基础 同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax 不同 ——定量分析的基础 第八章 吸光光度法 第二节 光吸收的基本定律 第八章 吸光光度法 一、光吸收的基本定律 －－朗伯-比耳定律 朗伯定律:A=lg(I0/It)=k1b 当入射光的? ,吸光物质的c 一定时,溶液的吸光度A与液层厚度b成正比. 比尔定律：A=lg(I0/It)=k2c 当入射光的? ,液层厚度b 一定时,溶液的吸光度A与吸光物质的c成正比. 第八章 吸光光度法 （一）朗伯-比尔定律 A=lg(I0/It)=kbc 1.物理意义 当一束平行的单色光垂直通过某一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，其吸光度(A)与溶液液层厚度(b)和浓度(c)的乘积成正比。 它不仅适用于溶液，也适用于均匀的气体、固体状态，是各类分光光度法进行定量分析的依据。 第八章 吸光光度法 ２.　朗伯-比尔定律的适用条件 应选用?max处测定。 第八章 吸光光度法 ３. 吸光度的加和性 当介质溶液中含有多种吸光组分时，只要各组分间不存在