显微镜直接计数和平板菌落计数.pptVIP

一. 实验目的 1. 学习、掌握显微镜直接计数法和平板菌落计数法； 2. 了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。 　二、实验原理 　　　 测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微镜直接计数法和平板菌落计数法。 （一）显微镜直接计数法 　　 计数区的刻度有两种：一种是计数区 　分为16个中方格（中方格用三线隔开），而每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成16个小方格。 　　（一）平板菌落计数法 　　平板菌落计数法根据微生物在固体培养基上所形成的菌落一般由一个细胞繁殖而成的原理进行。即一长成的菌落代表一个活的细胞。计数时先将待测样品作一系列稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，再吸取一定量的稀释菌液接种到培养皿中，使其均匀分布于平皿中的培养基内，经培养单个细胞繁殖形成菌落，统计菌落数目即可计数出样品的含菌数。 ※显微镜直接计数法 ﹡优点：简单、快速、重复性高。 不足： 不能区分死细胞和活细胞，应用范围较窄； 一些小的细胞在显微镜下很难看到； 样品中菌液浓度不能低于106个/mL； 不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物测定。 ※平板菌落计数法 ﹡优点：灵敏度高、可以区分死活细胞、应用广。 用于食品、饮料等微生物检查及消