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肉苁蓉多糖(CDPS)对鸡 免疫ND疫苗效果的影响 专业：动物医学　 班级：04医师3　　　　　 学生：涂丽容 指导老师：黄庆洲（副教授） 研究意义 肉苁蓉是临床实践中常用的补肾壮阳类中药，药性多辛、温、燥，有补肾壮阳兼有润肠通便等功效。几乎存在于所有的有机体中，在调节机体免疫、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤等方面具有广泛的作用。能从细胞免疫、体液免疫及免疫细胞调节因子等方面广泛参与机体的免疫调节，显著增强机体免疫功能的活性。因此，将肉苁蓉多糖对机体免疫机能的调节作用应用于生产，以提高动物的抗病力及疫苗的免疫效果具有重要的临床意义。 随着我国养殖业发展，疾病也接踵而来，养鸡业中发病率高、危害极大的鸡新城疫病（ND）极其常见。虽然国内外广泛接种ND疫苗，但因疫苗免疫原性较差或机体自身的免疫机能降低等原因常导致该病免疫失败。因此，本课题拟初次将肉苁蓉多糖与鸡新城疫苗结合免疫肉鸡，观察其对肉鸡新城疫苗效果的影响，以了解肉苁蓉多糖对疫苗免疫效果的促进作用，为肉苁蓉多糖作为一种新型的免疫增强剂供临床生产应用提供试验依据。 研究内容 技术路线 实验方法 １.主要器材 旋转蒸发仪（上海亚荣）、超声波细胞破碎仪（宁波新 芝）、紫外分光光度计（TOSHIBA）、微量移液器（EPPENDORF）、显微镜(CANON)、低速度离心机、微量震荡器、96孔V型板等。 ２.主要药品 　　NDⅣ系Lasota弱毒冻干苗（哈尔滨兽研所）、肝素、副品红、α-醋酸萘酯、淋巴细胞分离液（均购自上海生工）、肉苁蓉多糖（含量大于85%，由西南大学荣昌校区动物医学系生理生化实验室提供）。 ３.实验动物 20日龄健康新城疫苗非免疫雄性AA肉鸡20只（购于荣昌畜禽苗市场）。 鸡血清中HA-HI抗体效价的测定 　 1　 血凝（HA）试验 参考兽医微生物学实验指导 2 　血凝抑制（HI）试验 参考兽医微生物学实验指导进　　　　行 α-醋酸萘脂试验(ANAE) 试验动物免疫后15天时，翅静脉采集肝素抗凝血，分离淋巴细胞进行ANAE试验，计算ANAE阳性率。（具体试验方法参照实验指导） 中和保护试验 血清与病毒稀释后接种7日龄的非免疫鸡胚，观察鸡的死亡数。（具体试验步骤参照兽医微生物学实验指导） 经费预算 1.动物、饲料及人工费： 100.00 2.试验药品费： 100.00 3.试剂盒及检测费： 500.00 4.信息资料、差旅费： 100.00 合计： ８00.00 研究进度 * * 研究意义 1 研究内容 2 技术路线 3 实验方法 4 研究进度 5 肉苁蓉多糖对鸡免疫ND疫苗后血清抗体效价的影响 鸡不同方法免疫ND疫苗后鸡血清对鸡胚的中和保护效果 肉苁蓉多糖对鸡免疫ND疫苗后血清中T淋巴细胞数量的影响 实验动物的选择和准备 动物的分组和饲养 免疫后10、20、30、40天采血 抗体效价的测定 中和保护试验 ANAE试验 多糖加ND免疫 组 ND疫免疫组 鸡胚的准 备 血清的收 集 制备淋巴细胞悬液 ND免疫程序的制定 2007.7—8 2007.9—12 2008.1—2 2008.6—7 资料收集、综述撰写和开题报告 动物的饲养及动物免疫效果实验 数据的整理及毕业论文的撰写 毕业论文答辩