医学不同领域科研课题的设计课件.ppt

科研设计(research design) 指有关科学研究具体内容方法的设想、设计和计划安排，即科研总题目（科研规划）中某一具体分题的近期实验观察内容。 医学科学研究工作的组成部分： 科研设计 研究实施 分析结果、给出结论 各个部分环环紧扣、结合严密。 医学科研工作的共性和特点： ①人类有关疾病预防、诊断和治疗的研究成果须通过临床研究加以验证（因为动物模型的结果并非与人一致） ②个体差异大、实验条件不易控制； ③常涉及医德与伦理学问题； ④研究内容广泛、涉及学科众多。 医学科研的分类原则； (1)按医学专业的属性：基础医学、临床医学、预防医学、社会医学、（包括心理学）的科研。 (2)按研究对象的属性：实验性科研；临床试验性科研；社区干预试验性科研。 (3)按研究对象属性和实验场所不同：调查性科研；实验性科研；临床试验性科研。 医学科研设计的推荐程序 第一节 基础医学科研设计的基本思路与策略 一、形态学研究 形态学研究指通过一定方法和技术，使生物体局部形态结构可视化或成像并分析，从而解释生命的某种存在状态。 形态学研究包括解剖学、组织学、胚胎学、细胞学及细胞超微结构等。 形态学研究—— 通过对正常形态结构及病理形态改变的比较分析， 揭示形态、结构与功能的密切关系，扩大和加深人类对疾病的理解。 （一）形态学研究的手段： ①化学方法，如组织化学、细胞化学和免疫组织化学等，可了解各种化学成分（糖原、蛋白质、DNA、RNA和酶等）在组织中的定位； ②显微技术，如光学显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜和电子显微镜； ③切片技术，如石蜡切片、冷冻切片、超薄切片、冰冻蚀刻等。 （二）形态学观察工具 （三）形态学研究的组织处理原则 进行形态学研究时须考虑形态、结构与功能的关系，以及多层次研究、形态学技术与分子生物学技术结合等基本策略。 此外，须对固定、切片、染色等环节进行精确设计。 1．固定和固定剂 为保持细胞和组织原有形态结构，防止组织自溶，开展研究时须对细胞和组织进行固定，使胞内蛋白质凝固，终止或抑制外源性和内源性酶的活性，并最大限度保存细胞和组织的抗原性，使水溶性抗原转变为非水溶性抗原，防止抗原弥散。 选择最佳固定液的标准： 最有利于保持细胞和组织形态结构； 最大限度保存抗原的免疫活性。 最常用固定剂为多聚甲醛，其不与蛋白质产生广泛交叉连接，故不影响探针穿透入细胞或组织。 2．组织切片技术 表 各类切片技术的优点和主要用途 3．染色方法 形态学研究中染色技术可以分为—— 组织学染色 组织化学和细胞学染色 免疫组织（细胞）化学技术 原位杂交技术 （四）形态学研究的定量技术 1．显微分光光度术 原理： 细胞内某种物质含量不同，其染色反应深浅不一，对一定波长的光吸收亦各异 即某物质的消光度与一定厚度和面积内该物质浓度成正比。 2．流式细胞术(flow cytometry，FCM) 利用流式细胞仪对溶液中细胞数量或表型进行迅速、精确分析，每秒钟可检测5000-10000个细胞 包括细胞大小、内部结构和表面标记，并可通过计算机进行多参数数据处理。 3．图像分析术 利用图像分析仪(image analyser) 通过获取有关图像形态的几何光密度及三维结构的信息，使细胞学、组织病理学等有关形态学研究走向定量化和立体化，更深刻地揭示形态与功能间的定量关系。 4．体视学技术 根据从切片所获得的定量资料，推论组织结构内待测结构的定量特征。 体视学测量应遵循如下原则： ①随机抽样或等同可能性抽样； ②盲法测量； ③所取切片包含待测结构的全部信息。 二．机能学研究 是一门研究机体功能变化规律的科学 主要在器官和系统水平观察、探讨机体功能和代谢变化规律。 实验机能学—— 是指以生理学、病理生理学、药理学等为基础，通过对研究对象施加一定影响因素，进行连续、动态地试验和观察，记录组织器官机能代谢的反应和变化，探索并揭示生理和疾病状态下这些变化的发生机制、条件及内外环境中各种因素（包括药物）的影响 掌握机体机能发生、发展及生理和病理变化的规律，为临床诊断和治疗疾病提供必要的理论和实验依据。 （一）机能学实验的分类 主要在动物体内完成 根据实验目的不同，分为以下两大类： 1．急性动物实验 此种动物实验周期常在数十分钟或数小时内完成。又分为离体实验和整体实验。 (1)离体实验：将分离的组织或器官置于体外合适的环境中，能够在一定时间内观察其生理功能。 如摘取动物心脏进行体外灌注，观察心肌本身的基本特性。离体实验容易控制实验条件，排除非处理因素干扰。直接将处理因素作用于靶器官或靶组织，观察其机能变化，并分析作用机制。 (2)整体实验：在麻醉或毁坏大脑．使动物丧失意识的前提下，手术暴露拟研究的组织或器官，进行实验。 如观察某种药物