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- 2018-02-21 发布于浙江
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[医药卫生]分枝杆菌实验室的标准化操作
直接涂片法步骤 染色(1) 玻片放在染色架上,玻片间距保持10毫米以上的距离,染色架下空间足够,方便加热 火焰固定(5秒钟将玻片过火4次) 滴加石炭酸复红染液,盖满玻片。 加热至出现蒸汽,勿使沸腾。脱离火焰,保持5分钟。 高海拔地区(西藏、青海):定期过滤染色液;如室温低则用前热水浴加热染液;火焰加热,由于海拔高、沸点低,需加热多次 染色(2) 脱色: 轻缓冲洗 沥水。 滴加脱色液,保持1分钟。 如不彻底,重复。 1.接通电源,打开开关上升聚光镜至最高,调节光圈70-80%大小2.将涂片放在载物台上,痰膜朝上 显微镜检查 读片时,首先从左至右观察; 纵向向下转换一个视野; 然后从右向左观察 分枝杆菌培养 培养基质控 前处理 接种和孵育 结果和报告 四、结果的观察与报告 接种后第3、7天各观察一次菌落生长情况 此后每周观察一次,直至满8周 每次观察记录菌落生长及污染情况 结核分枝杆菌的生长要求: 专性需氧菌 最适PH为6.5~7.2 温箱设定温度为36℃,温度范围35-37 小结 – 操作流程 涡旋振荡 1分钟 痰标本中加入 1-2倍体积 4%NaOH 分别接种0.1ml 前处理液至2 只培养基斜面 第3天、7天、此后每周 观察一次直至第九周, 记录菌落生长和污染 置36C温 箱培养 室温静置 15分钟 4 3 2 5 6 1 * * * * Smear
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