第二章、菌种的扩大培养2010.pptVIP

第二章、菌种扩大培养 第一节、菌 种 微生物在工业上的用途很广，包括化工、医药、食品、水产、国防、纺织、石油勘探及石油化工等方面。 微生物的代谢产物据统计已超过一千三百多种，而大规模工业生产的总计不超过一百多种； 微生物酶有近干种，而已在工业上利用的不过四五十种。可见，微生物资源不仅十分丰富，而且可挖掘的潜力还是很大的。 微生物工业对菌种的要求 能在廉价培养基上迅速生长。 生成所需的代谢产物产量高。 培养条件要求不高、易于控制 (糖浓度、温度、pH值、溶解氧、渗透压等) 。如在华南地区建厂，夏季气温炎热，宜选择耐高温的菌种。 生长速度和反应速度较快，发酵周期较短。 根据代谢控制的要求，选择单产高的营养缺陷型突变菌株或调节突变菌株或野生菌株； 抗噬菌体能力强的菌株，不易感染噬菌体； 菌种纯粹，不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定性； 不是病源菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素(包括抗生素、激素和毒素等)，以保证安全。 第二节、种子扩大培养 扩大培养的目的：为每次发酵罐的投料，提供相当数量的代谢旺盛的种子，以提高发酵效率。 种子的要求：一定的数量、代谢旺盛、不能染菌。 种子扩大培养流程如下： 斜面菌种---一级种子摇床培养---二级种子罐培养----发酵罐。 种子罐级数的确定 确定原则 种子罐的级数由发酵所需的菌种量确定，影响因素是：接种量和菌种的性质。 种子罐的级数愈少，愈有利于简化工艺及控制。级数少可减少种子罐污染杂菌的机会，减少消毒及值班工作量以及减少因种子罐生长异常而造成发酵的波动。 应当考虑到如何才能最低限度地占用发酵罐中非合成代谢产物的运转周期。 种子罐的级数随产物的品种及生产规模而定，也随着工艺条件的改变作适当的调整。 接种量的确定 大量地接入成熟的菌种，可以缩短生长过程的缓慢期，因而缩短发酵周期，节约了发酵培养的动力消耗，提高了设备利用率，并有利于减少染菌机会。接种量过多也无必要，因种子培养费时，而且过多地移入代谢废物，反而会影响正常发酵。 接种量与菌种的生长速度有关，如霉菌接种量一般为10%，酵母5-10%，细菌1-5%。 接种量与菌液中菌体的浓度有关，如使用孢子接种，接种量可明显减低。 实例 放线菌(抗生素生产)：放线菌的细胞生长繁殖速度较慢，常常用三级种子扩大培养，即将种子罐中之菌丝移植到较大的种子罐中扩大培养后，再移入发酵罐中，这种流程称为三级发酵。一般50t发酵罐多采用三级发酵，有的甚至采用四级发酵，如链霉素生产。 霉菌（酶制剂）：酶制剂发酵生产也采用三级发酵。 细菌(谷氨酸)：谷氨酸及其他氨基酸发酵所用的菌种是细菌，生长繁殖速度很快，所以采用二级发酵。 种子培养方法 一级种子培养方法（摇床培养） 液体培养法：三角瓶摇床培养。 表面法培养：茄子瓶、克氏瓶或瓷盘培养。 固态法培养：三角瓶、蘑菇瓶、克氏瓶、培养皿等麸皮培养。 二级及多级种子培养方法 固体培养：浅盘固体培养和深层固体培养，统称曲法培养 液体深层培养 液体深层培养的特点是容易按照生产菌种对于代谢的营养要求以及不同生理时期的通气、搅拌、温度与培养基中氢离子浓度等影响，选择最佳培养条件，溶解氧、温度、pH值等均有自控仪器。 载体培养 以天然或人工合成的多孔材料代替麸皮之类的固态基质作为微生物生长的载体，营养成分可以严格控制。 第三节、影响种子质量的因素 培养基：种子罐和发酵罐的培养基成分可相同也可不同，一般种子罐培养基的糖分要少而氮源要多。 种龄与接种量 温度 pH值 通气和搅拌 作业 叙述种子扩大培养的方法和目的。 叙述种子罐的级数确定原则。 在某种氨基酸发酵时，发酵罐容积为100立方米，装填系数75%，发酵罐接种量2%，种子罐接种量5%，请设计种子培养的级数和种子罐的容积。（要求种子罐容积不大于10立方米） Thanks！ * * *