1《微生物的培养与应用》.pptVIP

一、基础知识： (一)微生物 细菌的构造 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 自养菌: 异养菌: 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 选择培养基 * * 微生物的种类： 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 特点：结构简单,形体微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 细菌的结构 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。 菌落 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 光合自养型:光合细菌 化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌 放线菌 1、结构： 单细胞原核 分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝） 微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的 病毒的增殖 一、基础知识： （二）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 （1）按物理状态分： 固体培养基、液体培养基、半固体培养基 其中固体培养基用于菌种保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，半固体培养基可观察微生物的运动，液体培养基常用于发酵工业。 （2）按功能分： 选择培养基、鉴别培养基 （3）按成分分： 天然培养基、合成培养基 1.培养基的类型和用途 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录内容) 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质， 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(例如:生长因子，即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 4.培养基的用途 液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种 功　　能 来　　源 概　　念 生长因子 氮源 碳源 营养物质 凡能为微生物提供所需碳元素的物质 主要是葡萄糖，还有CO2、NaHCO3、脂肪酸、花生、石油 构成细胞物质和一些代谢产物；有些碳源是异养微生物的主要能源物质 凡能为微生物提供所需氮元素的物质 常用：铵盐、硝酸盐；其他如N2、氨、尿素、牛肉膏、蛋白胨 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 某些微生物生长不可缺少的微量有机物，如维生素、氨基酸、碱基等 酵母膏、蛋白胨、麦芽汁、玉米浆、动植物组织提取液等 酶和核酸的组成成分 定义 常用方法 微生物培养和组培中的应用 消毒 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物 煮沸 玻璃仪器 紫外线 实验室、操作台、衣物等 酒精溶液 手、外植体等 次氯酸钠溶液等 外植体 灭菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 高压蒸汽 培养基、玻璃仪器、棉塞、牛皮纸等 灼烧 接种环、涂布器 干热 玻璃仪器 二、无菌技术 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 …… (1)消毒的方法： 1.常用的消毒与灭菌的方法 (2)灭菌的方法： 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. 2.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 三 培养基的配制原则 ⑴目的要明确。 ⑵营养要协调。 ⑶pH等各种环境条件要适宜。 各类微生物所需的最适pH分别是：真菌是5.0—6.0，细菌是6.5—7.5，放线菌是7.5—8.5。 微生物种类不同 培养目的不同 自养或异养等 生