试验方案样本.docVIP

木醋杆菌产细菌纤维素发酵条件的优化研究 1试验目的 通过单因素试验和正交试验获得木醋杆菌最佳发酵条件 2材料与方法 2.1 菌种 木醋杆菌 菌种活化培养基 蔗糖2%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.5%，磷酸氢二0.27%，柠檬酸0.115%pH 6.0，115℃下灭菌15min。斜面活化培养基 %琼脂… 2.2.3发酵培养基 … 2.3 试剂 名称 品级 规格 D-葡萄糖 生化试剂 500g 1 蔗糖 分析纯 500 g/ 2 乙酸钠 分析纯 500 g/ 2 。 。 。 2.4仪器设备 名称 型号 精密PH计 PHS-3C型 上海精密科学仪器有限公司 电磁炉 JYC-19BE2 山东九阳小家电有限公司 料理机 JYL-350 山东九阳小家电有限公司 医用高压灭菌锅 EST056 锦州科学仪器 超净工作台 SW-CJ-2F1D 上海博迅实业有限公司医疗设备厂 恒温培养箱 DNP-9052型 上海精宏实验设备有限公司 振荡培养箱 BS-2F 上海精宏实验设备有限公司 电子分析天平 FA2104N 上海精密科学仪器有限公司 高速冷冻离心机 KDC-160HR 上海精宏实验设备有限公司 冰箱 BCD-201Q 上海科隆电器 2.5 工艺流程及操作要点 2.5.1工艺流程 2.5.2操作要点 2.4.1原料的预处理 。。。 2.4.2 菌种的活化和扩大培养 将保藏菌种别转接于活化培养中，在30℃下，培养3d，，℃下，培养d，如此连续活化2次，备用。将活化好的菌种转接于种子培养中，在28℃下，培养1d。 2.4.3发酵培养基的 。。。 2.4.4接种发酵和发酵工艺控制 将接种于培养基中置于℃下培养箱中培养d，测定液2.5.2.1温度对细菌纤维素生长的影响 250mL三角瓶，装100mL发酵培养基，接种量5%，初始pH 6.0，置于不同温度下发酵10d，取出测定细菌纤维素膜湿重，每个处理做3次重复，进行显著性检验。 发酵温度/℃ 湿重（3次重复） 28 30 32 34 2.5.2.2初始pH值对细菌纤维素生长的影响 。。。 初始pH值 湿重（3次重复） 5.0 5.5 6.0 6.5 2.5.2.3接种量对细菌纤维素生长的影响 。。。 接种量/% 湿重（3次重复） 1.0 1.5 2.0 2.5 2.5.2.4装液量对细菌纤维素生长的影响 。。。 装液量/mL 湿重（3次重复） 50 70 90 110 2.5.3正交试验 试验号 因 素 试验指标/湿重 （重复3次） 发酵温度/℃ A 初始pH值 B 接种量/% C 装液量/mL D 1 2 3 1 1（28） 1 （6.0） 1（5） 1（80） 2 1 2 （6.5） 2（7） 2（100） 3 1 3 （7.0） 3（9） 3（120） 4 2（30） 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3（32） 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K2 K3 　 R 2.6 试验指标测定方法 2.6.1细菌纤维素干重测定 。。。 2.6.2酸度测定 。。。 2.6.3总糖测定 。。。。 6 结果测定 发酵 扩大培养 活化 菌种 图 1工艺流程 分装 冷却 调配 接