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survivin反义寡核苷酸对乳腺癌mcf-7细胞株mmp-2及-江苏大学
生存素反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞株MMP-2及MMP-9表达的影响
许1,肖,霞2,燕2,蒋2,于2
(泰州市人民医院普外科,2.江苏大学附属人民医院病理科,江苏 212002)
【摘要】目的:研究生存素(survivin)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人乳腺癌细胞株MCF-7基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,以进一步阐明生存素介导乳腺癌浸润及转移的机制。方法:经脂质体介导将生存素 ASODN转染人乳腺癌细胞株MCF-7,用荧光显微镜检测转染效率,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法检测转染细胞生存素、MMP-2及MMP-9表达改变。结果:荧光显微镜检测结果显示生存素 ASODN可成功转染MCF-7细胞。与对照组相比,转染组细胞生存素、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达均显著降低。结论:生存素 ASODN转染可有效抑制MCF-7细胞生存素基因的表达,并降低其MMP-2、MMP-9表达,可能对乳腺癌具有基因治疗的效果。
【关键词】生存素;反义寡核苷酸;基质金属蛋白酶-2;基质金属蛋白酶-9;乳腺癌
Effect of survivin ASODN transfection on the expression of MMP-2 and MMP-9 in human
breast cancer cell
XU Wen-min1,XIAO , Xia2,LI Yan2,JIANG -tao2,YU 2
(1.Department of General Surgery, Taizhou People’s Hospital, Taizhou Jiangsu 225000 2.Department of Pathology, Affiliated People’s Hospital of Jinagsu University, Zhenjiang Jiangsu 221002,China)
[Abstract] Objective:To investigate the effect of survivin antisense oligodeoxynucleotide(ASODN) transfection on the expression of matrix metalloproteinase-2(MMP-2) and matrix metalloproteinase -9(MMP-9) in human breast cancer line MCF-7 and to provide experimental foundation for survivin ASODN gene therapy for breast cancer. Methods: Survivin ASODN was transfected into MCF-7 cells through lipofectin. The rate of transfection was detected by fluorescence microscopy. The expressions of survivin, MMP-2 and MMP-9 in transfected cells were detected by RT-PCR and Western blot. Results: Survivin ASODN was successfully transfected into MCF-7 cells. After the transfection, RT-PCR and Western blot analysis revealed that the expressions of survivin, MMP-2 and MMP-9 mRNA and their proteins of antisense group was decreased significantly, compared with the control group . Conclusion: The transfection of survivin ASODN could effectively down-regulate the expressions of survivin, MMP-2 and MMP-9 in MCF-7 cell. Survivin ASODN may provide potential gene therapy for breast
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