核质互作型雄性不育水稻分蘖期超氧化物歧化酶和丙二-江苏农业科学.PDFVIP

江苏农业科学　２０１４年第４２卷第８期 — ８１— 李建欣，代西梅，李林玉，等．核质互作型雄性不育水稻分蘖期超氧化物歧化酶和丙二醛含量变化［Ｊ］．江苏农业科学，２０１４，４２（８）：８１－８３． 核质互作型雄性不育水稻分蘖期超氧化物歧化酶 和丙二醛含量变化 李建欣，代西梅，李林玉，黄群策 （郑州大学／河南省离子束生物工程重点实验室，河南郑州４５００５２） 　　摘要：为进一步了解水稻雄性不育现象，研究了核质互作型雄性不育水稻不育系４５１Ａ及保持系４５１Ｂ分蘖期叶 片超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）含量的动态变化情况。结果表明，不育系水稻营养 生长阶段的分蘖期ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ活性以及ＭＤＡ含量表现异常，不育系水稻ＳＯＤ活性高于保持系，不育系水稻ＣＡＴ 活性低于保持系，导致不育系水稻ＭＤＡ含量较高，这可能引起了水稻能量、物质代谢异常，膜脂过氧化逐渐积累，从而 造成了花粉败育。 　　关键词：水稻；雄性不育系；分蘖期；超氧化物歧化酶；丙二醛 　　中图分类号：Ｓ５１１．０３　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１４）０８－００８１－０２ 　　雄性不育是雄性器官退化、发育不良或花粉败育，不能行 不育系不育的生理机制，旨在为进一步丰富水稻雄性不育理 使生殖能力而雌蕊发育正常的现象。雄性不育起源于遗传性 论提供依据。 远缘异质的植物杂交，后代产生了生理、代谢紊乱，致使雄性 １　材料与方法 生殖细胞败育。植物雄性不育有２种类型：一种为生理上的 雄性不育，是由逆境胁迫及各种理化因素造成的，不育性不能 １．１　材料 传给后代，育种上不能连续利用；另一种为遗传上的雄性不 核质互作型雄性不育水稻４５１Ａ及保持系４５１Ｂ均由河 育，是受雄性不育基因控制，这种基因一般属隐性，有重要的 南省新乡市农业科学院秋粮研究所提供。供试水稻种植于河 ［１］ 利用价值 。核质互作型雄性不育又称细胞质雄性不育（ｃｙ 南省新乡市农业科学院内，采用常规管理。水稻分蘖初期到 ｔｏｐｌａｓｍｉｃｍａｌｅｓｔｅｒｉｌｉｔｙ，ＣＭＳ），属于遗传不育。植物育性的表 后期每隔５ｄ取１次材料。取每株主茎上面第 １张全展叶， 达是由基因控制的生理过程、生化反应、形态构建的最终结 每次取３张叶中部，放冰上带回实验室统一进行酶活测定。 果，包括一系列物质代谢、能量代谢，涉及各种复杂的生理生 １．２　粗酶液提取和酶活性测定 化反应。基因控制酶蛋白的合成，酶又调控代谢反应，多个代 称取叶片样品０．５ｇ置于预冷的研钵中，加入 １ｍＬ预冷 谢反应的综合集中表现便是性状。因此育性的变化也是酶活 的磷酸缓冲液（ｐＨ值为７．８），冰浴研磨成浆，加缓冲液使终 ［２］ 性变化引起的结果之一 。植物在代谢过程中产生有氧自 体积为５ｍＬ，于１１０００×ｇ、４℃下离心 １５ｍｉｎ，上清液即为 ［３－４］ 由基，遇逆境胁迫时，植物体内大量增生自由基，致使膜脂过 ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ粗提液，３次重复 。采用 ＮＢＴ（氮蓝四 氧化严重，造成膜结构受损，蛋白质结构被改变，最终对生物 唑）光还原法测定叶片ＳＯＤ活性。反应液为３ｍＬＮＢＴ、１ｍＬ 体产生伤害。超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、 酶液，对照液为３ｍＬＮＢＴ、１ｍＬ磷酸缓冲液（ｐＨ值为７．８）， 过氧化氢酶（ＣＡＴ）是植物抗氧化酶促防御系统中的３个主要 ２５～３０℃、４０００ｌｘ于日光下反应 ２０ｍｉｎ，调零液遮光， － ＋ 酶类。ＳＯＤ对活性氧的清除反应过程为：２Ｏ ＋２Ｈ ＨＯ ５６０ｎｍ下测定吸光度值。