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毛细管电泳法简介
毛细管电泳法
姚彤炜 主讲
1
概述
• 毛细管电泳又叫高效毛细管电泳(High
Performance Capillary Electrophoresis, HPCE),
是80年代初发展起来的一种新型分离分析技术,
它是电泳技术与层析技术相结合的产物
• 广泛用于生物大分子,手性药物,生物体内的药物
及代谢物,中西药物及其制剂等的分析,在选择性
上与高效液相法有很大的互补性
• 被多国药典收载,如2010年版中国药典对盐酸头
孢吡肟中N-甲基吡咯烷的检查,USP对盐酸罗哌卡
因的对映体纯度检查,均采用毛细管电泳法测定
2
一、基本原理
• 高效毛细管电泳以高压电场为驱动力,以毛细
管为分离通道,依据各组分之间的迁移速度和
分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离
技术
• 在毛细管电泳中有两个重要的迁移:
–电泳迁移
–电渗流迁移
3
•电泳迁移
•在电场作用下,带电组分作定向移动。
其迁移速度(ν )可用下式表示:
ν = µ E (1)
e
–
µ 为电泳淌度
e
–
E为电场强度(V/L)——是外加电压
和毛细管长度的函数
4
•电泳迁移原理
•对于给定的离子和介质,淌度µ 为离子的
e
特征常数,其大小取决于分子所受的电场
力F 和其通过介质时的摩擦力F 的平衡:
E F
F = qE (q为离子电量)
E
F = -6πηrν
F
(η 溶液粘度, r 离子半径, ν 离子速度)
•达到平衡时,两种力大小相等而方向相反,
即
qE=6πηrν (2)
5
•电泳迁移原理
•根据式(1),淌度 µ = ν/E
e
•根据式(2),ν/E = q/(6 πηr)
•所以 µe= q/(6 πηr ) (3)
•式(3)表明,带电量大的物质,离子半
径小的物质有较高的淌度
6
•淌度
•淌度——物理常数,是在溶质带最大电
量时测定并外推至无限稀释
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