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纤毛鹅观草DREB类基因RcDREB1的克隆及其-IngentaConnect
植物遗传资源学报2013ꎬ14(5):857 ̄863
Journal of Plant Genetic Resources
纤毛鹅观草DREB类基因RcDREB1 的克隆及其
蛋白结合干旱应答元件DRE的功能验证
1 1ꎬ2 1 1 1
赵艳红 ꎬ郎明林 ꎬ王小龙 ꎬ温淑敏 ꎬ刘桂茹
1 2
( 河北农业大学农学院ꎬ保定071000ꎻ 清华大学生命科学学院ꎬ北京100084)
摘要:以纤毛鹅观草为材料ꎬ通过RT ̄PCR和RACE技术ꎬ首次克隆了一个纤毛鹅观草DREB类基因的全长cDNA序列ꎬ
命名为RcDREB1ꎮ 该基因编码蛋白含有一个保守的AP2 结构域ꎬ表明该基因是AP2 大家族的一个新成员ꎮ 种系发生树分析
表明ꎬRcDREB1与小麦AP2 家族DREB类基因高度同源ꎮ 酵母单杂交试验表明ꎬRcDREB1表达的蛋白具有特异结合干旱应答
DRE元件的功能ꎻ通过实时定量PCR分析发现ꎬ高盐、干旱、重金属镉和低温胁迫均可诱导RcDREB1表达ꎬ但其对高盐反应较
为显著ꎮ 本研究表明ꎬRcDREB1是DREB类转录因子基因ꎬ在介导植物响应逆境信号方面可能发挥着重要生物学功能ꎬ为进
一步分析小麦族的进化和转基因应用奠定了基础ꎮ
关键词:纤毛鹅观草ꎻDREBꎻRACEꎻ种系发生树ꎻ酵母单杂交ꎻ实时定量
Cloning of a DREB ̄like GeneRcDREB1 inRoegneria ciliar and Functional
Identification of its Protein Binding Specificity to the
Dehydration ̄responsive Element DRE
1 1ꎬ2 1 1 1
ZHAO Yan ̄hong ꎬLANG Ming ̄lin ꎬWANG Xiao ̄long ꎬWEN Shu ̄min ꎬLIU Gui ̄ru
1
( College of AgronomyꎬAgricultural University of HebeiꎬBaoding 071000ꎻ
2College of Life ScienceꎬTsinghua UniversityꎬBeijing 100084)
Abstract:In this paperꎬa full ̄length cDNA of a DREB ̄like gene was cloned firstly from Roegneria ciliaris
through RT ̄PCR and RACE technologiesꎬand named asRcDREB1.RcDREB1contained a conserved AP2 domainꎬ
suggesting that this gene was a new transcription factor member in the AP2 superfamily.Phylogenetic tree analysis
showed that RcDREB1 shared a high similarity with the DREB ̄like genes in Triticum aestivum.Through yeast one ̄
hybrid experimentꎬRcDREB1 wasverifiedtopossessan ability to specifically bindthe drought ̄responsive DRE ele ̄
ment.Using real ̄time quantitativePCR
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