纤毛鹅观草DREB类基因RcDREB1的克隆及其-IngentaConnect.PDFVIP

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纤毛鹅观草DREB类基因RcDREB1的克隆及其-IngentaConnect

植物遗传资源学报2013ꎬ14(5):857 ̄863 Journal of Plant Genetic Resources 纤毛鹅观草DREB类基因RcDREB1 的克隆及其 蛋白结合干旱应答元件DRE的功能验证 1 1ꎬ2 1 1 1 赵艳红 ꎬ郎明林 ꎬ王小龙 ꎬ温淑敏 ꎬ刘桂茹 1 2 ( 河北农业大学农学院ꎬ保定071000ꎻ 清华大学生命科学学院ꎬ北京100084)     摘要:以纤毛鹅观草为材料ꎬ通过RT ̄PCR和RACE技术ꎬ首次克隆了一个纤毛鹅观草DREB类基因的全长cDNA序列ꎬ 命名为RcDREB1ꎮ 该基因编码蛋白含有一个保守的AP2 结构域ꎬ表明该基因是AP2 大家族的一个新成员ꎮ 种系发生树分析 表明ꎬRcDREB1与小麦AP2 家族DREB类基因高度同源ꎮ 酵母单杂交试验表明ꎬRcDREB1表达的蛋白具有特异结合干旱应答 DRE元件的功能ꎻ通过实时定量PCR分析发现ꎬ高盐、干旱、重金属镉和低温胁迫均可诱导RcDREB1表达ꎬ但其对高盐反应较 为显著ꎮ 本研究表明ꎬRcDREB1是DREB类转录因子基因ꎬ在介导植物响应逆境信号方面可能发挥着重要生物学功能ꎬ为进 一步分析小麦族的进化和转基因应用奠定了基础ꎮ     关键词:纤毛鹅观草ꎻDREBꎻRACEꎻ种系发生树ꎻ酵母单杂交ꎻ实时定量 Cloning of a DREB ̄like GeneRcDREB1 inRoegneria ciliar and Functional Identification of its Protein Binding Specificity to the Dehydration ̄responsive Element DRE 1 1ꎬ2 1 1 1 ZHAO Yan ̄hong ꎬLANG Ming ̄lin ꎬWANG Xiao ̄long ꎬWEN Shu ̄min ꎬLIU Gui ̄ru 1 ( College of AgronomyꎬAgricultural University of HebeiꎬBaoding 071000ꎻ 2College of Life ScienceꎬTsinghua UniversityꎬBeijing 100084) Abstract:In this paperꎬa full ̄length cDNA of a DREB ̄like gene was cloned firstly from Roegneria ciliaris through RT ̄PCR and RACE technologiesꎬand named asRcDREB1.RcDREB1contained a conserved AP2 domainꎬ suggesting that this gene was a new transcription factor member in the AP2 superfamily.Phylogenetic tree analysis showed that RcDREB1 shared a high similarity with the DREB ̄like genes in Triticum aestivum.Through yeast one ̄ hybrid experimentꎬRcDREB1 wasverifiedtopossessan ability to specifically bindthe drought ̄responsive DRE ele ̄ ment.Using real ̄time quantitativePCR

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