荧光光谱荧光光谱.PDF

第第55章章荧光光谱荧光光谱 5.1 基本原理 5.2 荧光探测 5.3 荧光光谱的应用 11/45/45 5555..1111 基本原理基本原理基本原理基本原理 光致发光，发射光谱，吸收+发射 光致发光可以在紫外-可见光区、X射线区等 22/45/45 55.11.11 荧光发光原理荧光发光原理 33/45/45 光致发光的能级向下跃迁过程光致发光的能级向下跃迁过程 ①无辐射跃迁：激发态→第一电子激发态的最低能级 在激发态因碰撞以热的形式损失能量在激发态因碰撞以热的形式损失能量，跃迁到第跃迁到第一电子电子 激发态的最低能级 ②荧光发射：第一电子激发态的最低能级→基态能级 由第一电子激发态的最低能级跃迁至基态，光的形式释 放能量，即荧光 ③③磷光发射磷光发射：：三重态三重态→→基态能级基态能级 先无辐射跃迁至三重态，逗留较长时间后再跃迁至基态 能级能级，发射磷光发射磷光 44/45/45 荧光与磷光的区别 从激发态跃迁到基态的路径不同从激发态跃迁到基态的路径不同 -99 -77 从激发到发光的时间不同从激发到发光的时间不同，荧光荧光1010 ~ 1010 ss -3 磷光磷光10 ~10s ((三重态是重态是亚稳态稳态)) 发光波长不同，荧光波长比磷光波长短 55/45/45 55.11.22 荧光光谱与吸收光谱荧光光谱与吸收光谱 66/45/45 紫外紫外-可见吸收光谱可见吸收光谱 荧光光谱荧光光谱 光谱类型 吸收光谱 发射光谱 波长范围 紫外200-380 nm，可见380-760 nm 探测灵敏度探测灵敏度 不如荧光光谱高不如荧光光谱高 ppbppb量级量级，，1010-9 产生机理 电子能级跃迁，一次跃 电子能级跃迁，两次跃 迁迁，吸收吸收 迁迁，吸收吸收++激发激发 光谱形状 带状、连续 呈镜像关系呈镜像关系，荧光谱带波长比吸收谱带波长长荧光谱带波长比吸收谱带波长长 吸收光谱可能存在多套光谱 77/45/45 55.11.33 产生荧光的基本条件产生荧光的基本条件 入射光要能被物质粒子吸收入射光要能被物质粒子吸收，，使粒子能够跃迁到激使粒子能够跃迁到激 发态，然后经第一电子激发态的最低能级，降落到基态 振动能级 物质粒子要具具有高高的荧光光效率率