GSK3β抑制剂SB216763通过激活小鼠成纤维细胞自噬相关蛋白抑制.PDFVIP

中国医药生物技术 2014 年 12 月第 9 卷第 6 期 Chin Med Biotechnol, December 2014, Vol. 9, No. 6 411 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2014.06.001 ·论著· GSK3β抑制剂 SB216763 通过激活 小鼠成纤维细胞自噬相关蛋白 抑制 TGF-β1 诱导的 I 型胶原产生 刘虹，王佳平，辛冰牧，邵荣光 【摘要】 胶原的转录继而导致胶原表达增加[5] ；同时，在肺 目的 探讨 SB216763 对小鼠成纤维 3T3-NIH 细胞 I 型 纤维化的肺组织中，胶原的降解能力也是被显著抑 胶原表达和分泌的影响。 制的[3, 6] 。因此，恢复肺组织中胶原的降解能力， 方法 使用转化生长因子 TGF-β1 诱导胶原的表达，使用 有可能成为治疗肺纤维化疾病的新思路。 天狼猩红染色试剂盒及 Western blot 检测 I 型胶原和自噬 自噬是细胞的一种自我代谢过程，有利于细胞 相关蛋白的表达。 在外界刺激下维持自身稳态平衡。近来有报道指 出，在肺纤维化疾病中，自噬是降解胶原的主要方 结果 给予 TGF-β1 后，细胞培养上清中胶原含量从（11.85 式[3, 6] 。Fernandez 和 Eickelberg[7]直接指出，在多 ± 0.90 ）mg/ml 上升至（16.70 ± 0.67）mg/ml （P 0.001 ）， 说明 TGF-β1 可以剂量依赖地促进成纤维细胞中胶原的表 种肺部疾病中，自噬是组织细胞维持代谢平衡、促 进细胞生存的主要机制。上述研究报道均是在动物 达与分泌；同时，TGF-β1 还可以抑制自噬相关蛋白 Vsp34 、 模型中探讨自噬的活性与肺纤维化发生的关系，目 Beclin-1 的表达，促进 p62 的堆积；给予 SB216763 后， 前仍缺乏在细胞水平，尤其是在成纤维细胞中，自 细胞培养上清中胶原的含量从（16.83 ± 0.47）mg/ml 下降 噬活化可以促进胶原降解的证据。 为（13.16 ± 0.45）mg/ml （P 0.05 ），说明 SB216763 可以 降低 TGF-β1 诱导 I 型胶原的表达；此外，SB216763 还 糖原合成激酶 3β （glycogen synthase kinase 3β， 可以恢复成纤维细胞中自噬相关蛋白 Vsp34 、Beclin-1 的表 GSK3β）是一种丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶，可以参与 调控多种细胞活动，其中包括能量代谢、神经细胞 达，降低 p62 的表达。 的形成及发育等。我们的前期工作表明，GSK3β 的 结论 小分子抑制剂 SB216763 通过激活自噬活性抑制 小分子抑制剂 SB216763 可以通过促进 Bcl-2 与 TGF-β1 诱导的 I 型胶原表达。 GSK3β 的结合，抑制 Bcl-2 与 Beclin-1 的结合， 【关键词】 自噬； 胶原 I 型； 转化生长因子 β1； 激活自噬核心复合物，从而上调自噬的活性[8] 。然 SB216763 而，SB216763 能否通过活化自