一种简单经济高效的大量肝细胞培养方法R.PDFVIP

年 第 卷 第 期 生 物 学 通 报 #((: )( + ); 一种简单 经济 高效的大量肝细胞培养方法R ( ( ! ! ! ! 刘友平 丁慧荣 何 涛 代荣阳 李 洪 ’+ 泸州医学院生物化学教研室 # 泸州医学院分子生物学研究室 四川泸州 3)3((( 摘要 采用组织 切割分离法 加 胰蛋白酶消化法 两种传统方法的组合 获得细小的肝组织块进 ! ! # 行贴壁法培养 待肝细胞长满瓶底 肝细胞为主 即传一代 目的去组织块及其他间质细胞 继续培养 # $ % $ % # 可获得高密度 高纯度 高活力的肝实质细胞 本实验方法操作简单 经济 高效 适用于一般实验室进 ’ # 行大规模肝细胞培养的细胞培养方法( 关键词 肝细胞培养 乳小鼠 传代 间质细胞 肝组织内血窦丰富 血细胞多 而且还存在其他 贴壁法原代培养 再精心地传一代 可培养出高密度 $ $ $ $ ( .*/ 细胞 对肝细胞的分离和培养不利 大多数研究者之 高纯度 高活力的肝实质细胞 为一般实验室提供了 $ ( $ 所以要采用繁琐的两步胶原酶灌注法培养肝细胞 如 足够量的单一类型细胞 $ 两步胶原酶灌注法 酸性磷酸盐灌注法 液 材料与方法 ( (5$=? ! 灌注法 胶原酶消化法等 目的就是要尽量去除血窦 实验材料 昆明种封闭群乳小鼠由泸州医学院 ( $ !! 内的血细胞及其他间质细胞 以获得较纯的肝细胞进 动物科提供 培养基 新生小牛血清均购于 $ ( @A@ . +/