[理学]第七章：原核生物基因表达调控.ppt

第六章：原核生物基因表达调控 一、原核生物基因表达调控总论 二、乳糖操纵子 三、半乳糖操纵子 四、色氨酸操纵子 一、原核生物基因表达调控总论 原核生物基因调控一般执行如下规律 一个体系需要时被打开，不需要时被关闭。 基因的开与关是相对的。 开-关的活性可以通过转录水平上进行调节。 原核生物主要受到营养状况和环境因素的影响 真核生物主要是受发育阶段和激素水平的影响 基因表达调控主要表现在二个方面 转录水平上的调控 转录后水平上的调控 转录水平上的调控 负转录调控 负控诱导 阻遏蛋白不与效应物结合时基因不转录。 负控阻遏 阻遏蛋白与效应物结合时，基因不转录。 正转录调控 正控诱导 有效应物时，激活蛋白处于活性状态基因转录。 正控阻遏 有效应物时，激活蛋白处于无活性状态基因不转录。 1、原核生物基因调控机制的类型 A、代谢产物对基因活性的调节 诱导调节 是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由关---开。 阻遏调节 基因是开启的，但由于一些特殊代谢物或化合物的积累将其关闭。 弱化子 在操纵区与结构基因之间的一段可以 终止转录 作用的核苷酸序列，称为弱化子。? 前 导 区 P O 162 bp E D C B A 123~150 前导RNA 弱化子 高色氨酸时 低色氨酸时 AUG 7kb mRNA 有葡萄糖的存在即使在培养基中加入乳糖、半乳糖等诱导物，操纵子也不会启动，这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。 因为葡萄糖是最方便的能源，细菌所需能源可从葡萄糖得到满足，无需启动其它基因。 当细菌生长过程中，氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生应急反应，停止全部基因的表达。 产生应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp），是由空载的tRNA所引起的 。 空载tRNA会激活焦磷酸转移酶，使ppGpp大量合成，ppGpp的出现会关闭许多基因，PpGpp与pppGpp的作用能够影响一大批操纵子，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 2、启动子与转录起始 启动子的结构影响了它与RNA聚合酶的亲合力，从而影响基因的表达水平。 -10区与-35区的最佳间距 -35区与-10区之间的距离大约是16~19bp，小于15bp或大于20bp都会降低启动子的活性。 -35 17±1 -10 ----TTGACA----------------------------TATAA----- 16 25 3、增强子可以提高转录的水平 在转录起始点上游约-200bp处的两段72bp长的重复序列，能增强或促进转录的起始，去除这两段序列会大大降低转录水平。 4、RNA聚合酶与启动子的相互作用 （1）启动子区的识别 RNA聚合酶首先与非特异性结合位点相结合，形成过渡中间体，这种结合促进了酶向启动子移动，最终达到特异性结合，也称为扫描式。 （2）酶与启动子的结合 RNA聚合酶与启动子区结合，形成二元复合物，然后开始合成RNA，形成三元复合物。 二元复合物 = 酶+DNA 三元复合物 = 酶+DNA+RNA （3）δ因子的结合和解离 δ因子在酶与启动子结合的过程中起重要作用： ① 提高酶辨认启动子的能力； ② 降低酶与DNA的非特异性结合； ③ 促进DNA开链； ④提高RNA链合成起始的速度； ⑤ 阻止酶分子聚合。 5、环腺苷酸受体蛋白对转录的调控 cAMP受体蛋白CRP（ cAMP receptor protein ）， cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（ cAMP activated protein ）。 在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。 CAP能提高酶与启动子结