[生物学]第五章紫外-可见吸收光谱法.pptVIP

第五章 紫外－可见分光光度法;概 述; ; ;原子吸收光谱法与紫外－可见分光光度法的比较;紫外-可见分光光度法的特点： 1 与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快。 2 灵敏度高。如在紫外区直接检测抗坏血酸时，其最低检出浓度可达到10-6g/mL。 3 ?选择性好。通过适当的选择测量条件，一般可在多种组分共存的体系中，对某一物质进行测定。 4 精密度和准确度较高。在仪器设备和其他测量条件较好的情况下，其相对误差可减小到1%~2%。 5 用途广泛。在生物、医药、化工、地质等诸多领域，不但可以进行定量分析，还可以对被测物质进行定性分析和结构分析，进行官能团鉴定、相对分子质量测定、配合物的组分及稳定常数的测定等。; ;; ; ; ; ; ; ; ; ;; ; ; ;n→σ*跃迁： 所需能量较大，λ在150～250nm处，εmax较低，~200。 含有杂原子（氧、氮、硫、卤素等）的饱和烃衍生物都可发生此类跃。如：－NH2、－OH、－S、－X 。 一氯甲烷 n→σ*跃迁： λmax 173nm 甲醇 n→σ*跃迁： λmax 183nm;π→π*跃迁： 所需能量较小，λ一般＞200nm，εmax ＞ 104。 不饱和基团（ － C= C －、－C=C－