七组织培养第七章　细胞培养演示幻灯片课件.pptVIP

第七章 细胞培养 宜职院08.9;目的与要求 掌握单细胞培养概念，了解单细胞制备途径，掌握单细胞培养繁殖的方法。掌握植物细胞悬浮培养的意义和细胞株筛选方法，了解悬浮培养类型及方法，清楚细胞悬浮培养的应用。 具有单细胞分离和培养基本能力，具备细胞悬浮成批培养和连续培养基础知识。 ; 细胞培养，即通过细胞继代培养，使细胞无限增殖，并使高等植物的单个细胞，在离体培养条件下，通过诱发细胞分裂形成细胞团，再分化形成具根芽的完整植株。;第一节 单细胞培养 一、单细胞培养意义 1、建立单细胞无性系 2、对培养的单细胞科诱发突变 3、排除体细胞干扰 4、遗传转化受体的建立;二、单细胞的分离 1、愈伤组织诱导 材料自来水冲洗——75%的乙醇擦洗——将材料切成小块（带形成层）——接种到MS+2,4-D 2mg/L+CH 500mg/L+琼脂0.8%,pH5.8的培养基上——得愈伤组织——扩大繁殖。 2、单细胞悬浮液的制备 愈伤组织转移到液体培养基中——4r/min转床培养10d——140m×140m的细胞筛过筛——使细胞密度达到10 个/ml左右——得单细胞悬浮液。 ;三、单细胞培养方法 （一）看护培养法 用一块活跃生长的愈伤组织块来看护单个细胞，并使其生长和增殖的方法。 （1）取处于活跃生长期约1厘米大小愈伤组织块。 （2）无菌条件