血清雌二醇放射免疫试剂盒的研制.PDFVIP

( ) 304 核 农 学 报 　2003 ,17 4 :304～307 　 Acta Agriculturae N ucleatae Sinica ( ) 文章编号 2003 0430404 血清雌二醇放射免疫试剂盒的研制 张丁联 　潘家荣　王 　斌 ( 中国农业科学院原子能利用研究所 ,农业部农业核技术与航天育种重点开放实验室 ,北京　100094) ( ) 125 125 摘 　要 :制备了雌二醇抗体 抗 E 6CMOBSA 和 I 放射配体 E 6CMOhistamine I ,建 2 2 立了血清雌二醇放射免疫分析方法 ,其特点是通过微量标记法提高标记物比活度 ,不用 乙醚萃取直接测定血清样本 ,简化了测量步骤 ,缩短了测量时间, 且试剂稳定时间可延 长至 2 个月以上 。应用本法可以快速测量动物及人的血清样本 ,25～3h 即可得出结 果 。 关键词 : 雌二醇 ; 抗体 ; 125 I 放射配体 ; 小体积标记 ; 放射免疫分析 ( ) 雌二醇 E 是天然雌激素的重要成分 ,并且是女性月经周期中分泌的主要雌性激素 。测定 2 血清中 E 的含量具有重要的医学意义 ,而监测动物血清中 E 的含量对研究动物内分泌、发育和 2 2 繁殖也十分必要 。在食品安全方面 ,为防止少女性早熟等问题 ,农产品和食品中的雌二醇的监测 [ 1 ,2 ] 也是不容忽视的 。 雌二醇的测定多采用放射免疫分析、酶联免疫分析或化学发光免疫分析 ,其中放射免疫分析 [3 ] 2 成本低而且结果准确 。由于 E 的含量很低 ,测定时要求标记物有较高的比活度 ,而 1 个月后 标记物比活度下降灵敏度可能达不到要求 ,所以试剂盒一般需每月制备 。本研究试图通过采取 微量小体积标记法 ,提高标记物比活度 , 同时配合其他措施 ,研制不用乙醚萃取而可直接测定血 清样本雌二醇的放射免疫试剂盒 ,并延长试剂盒的稳定期 。 1 　材料与方法 11 　试剂 雌酮、雌二醇、雌三醇、睾酮、孕酮、醛固酮、DHEA 、E 6CMO 及 histamine 购 自SIGMA 公司 , 2 其他化学试剂购自北京化学试剂公司 ,Na 125 I 购自中国原子能研究院。 12 　研制方法 [4 ] 121 　抗 E 6CMOBSA 的制备 　取 E 6CMO 52mg 溶于 200μ 2 2