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麻省理工大学生物学教研室
麻省理工大学生物学教研室
7.02 实验性生物学 交流, 2005 年 春
7.02/10.702 2005 春
7.02/10.702
微生物遗传学考试
学习问题
参考答案
1
7.02/10.702 2005 春
问题 1
你有一个未稀释的 pNK/KBS1 E.coli 培养物，已知其浓度为 4 x1011 细胞/升，且 1 个
pNK/KBS1 OD550 单位=1 x 108 cfu/mL
a) 你想要这个培养物的一个具体的 OD550 数值。你要用多大的稀释系数来稀释细胞以保证
最后测量 OD550 时分光光度计读数精确到 0.25 ？ 请列式计算。
1. 计算 OD550 读书为 0.25 时的细菌滴度：
0.25 的 OD550 x ___1 x 108 7
cfu/mL___ = 2.5 x 10 cfu/ml
1 OD550
2. 计算未稀释细菌的滴度（每毫升）：
11 8
___4 x 10 cells___ x ___L___ = ___4 x 10 cells (cfu)___
L 1000 mL mL
3. 计算稀释系数（dilution factor ，DF）：
8 7
___4 x 10 cells (cfu)__ x dilution factor = ___2.5 x 10 cfu____
mL mL
DF = 0.0625 or 1/16 稀释比例
b) 完成下列语句以描述你是怎样制备 1 mL OD550 为 0.25 的稀释物：
我加入____62.5______微升(μL)的培养物到___937.5_______微升(μL)的稀释物中以获
得终体积为 1 mL 的产物。
c) 如果你制备了一个 OD550 为 0.25 的 1:10,000 稀释的培养物，并吸取 100 μL 该稀释培养
物铺到一个 LB 平板上，在平板上将有多少克隆生长？请列式计算。
1. 先将 OD550 转换成 cfu/mL ：
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