生物芯片技术及应用进展概述.pdfVIP

322 医学检验杂志2009年 笙 鲞筮 塑 堕』里尘 !型 !翌型：’ 【综 述 】 【Renews】 生物芯片技术及应用进展概述 BRIEFINTRODUCTIONOFBIOCHIPTECHNIQUEANDITSAPPLICATION 李敏红 (武汉市蔡甸区中医医院检验科 430100) 关键词 生物芯片技术；基因芯片；蛋白芯片；细胞芯片；组织芯片；芯片实验室；临床诊断 Keywords Biochiptechnology；Genechip；Proteinchip；CeHschip；Tissuechip；Lab—on—chip；ClinicalDiagnosis [中图分类号] R446 [文献标识码] A [文章编号] 1606—8025(2009)05—322-03 生物芯片技术是在20世纪90年代中期，伴随人类基因组 因芯片，这也是有关于生物芯片的最早报道 。 计划(HumanGenomeProjict，HGP)发展起来的一类生物分析 微阵列基因芯片技术应用时包括四个主要步骤：芯片制 技术，现已广泛应用于基因测序与基因表达分析、基因突变和 备、探针标记、杂交反应、信号检测和结果分析。其中高密度 多态性检测、转基因食品的检测 、食品中微生物的检测、临床 阵列基因芯片采用荧光素标记探针 ，部分阵列密度较小的芯 医学、疫苗研制等方面，并成为科学界的研究热点之一 。本 片采用同位素标记。杂交反应与经典的核酸分子杂交方法 文就生物芯片的主要分类、工作原理、发展历程和临床应用进 (southern、northern)一致，属于固相 液相反应模式，所要注意 行综述。 的问题是杂交条件 (如杂交时问、温度、样品浓度等)的优化。 生物芯片技术融合生物学、医学、物理学、化学以及计算 而芯片的制备和信号的检测分析方面，其技术和设备要求远 机科学为一体，利用现代科技和工艺将生物化学分析系统进 高于上述两个步骤。 行微缩，变过去传统的多个、不连续 的分析过程为一个连续 微阵列基因芯片的制备是以玻璃片、硝酸纤维素膜和硅 的、快速的检测分析过程 ，既能节约时间又能节省试剂费 片等基片为载体，制备方法基本上可分为两大类：一类是原位 用。利用生物芯片技术可以快速、准确地对基因进行测序、扫 合成；另一类是合成后交联。原位合成指直接在载体上用四 描；对蛋白质进行定性 、定量分析；对细胞进行分离、鉴定等， 种核苷酸合成所需的探针，适用于制备寡核苷酸基因芯片；而 使生物芯片技术在人类疾病的诊断、治疗、新药开发等方面发 合成后交联则是将预先制备好的探针定位在经特殊处理的载 挥巨大作用 。 体上，多用于大片段 DNA，有时也用于寡核苷酸，甚至mRNA。 目前，生物芯片根据检测分析的生物组分不同分为：基因 由于光刻设备技术复杂，只能由专业化公司生产，加之成 芯片(包括寡核苷酸芯片和 cDNA芯片)、蛋 白质芯片、细胞芯 本高以及合成效率低等原因，使许多公司转向开发新的原位 片和组织芯片 。。又可以根据其工作原理不同分为：微阵 合成技术，其中原位喷印合成技术最具代表性，其原理与传统 列芯片、毛细管电泳芯片、免疫芯片、质谱分析芯片、液态芯片 的DNA固相合成一致，形式类似于喷墨打印，只不过芯片喷印 等 。 头及墨盒有多个 ，墨盒中装的是四种碱基等液体。喷印头可 人类最早开发的生物芯片是微阵列式基因芯片，其原理 在整个载体上移动，根据载体上不同位点探针的序列要求将 基于一个多世纪前，由SouthernED发明的核酸分子杂交检测 特定的碱基喷印在特定的位置。 方法，即Southern印迹 (Southernblot)检测