吴颖川完整版小老鼠胰岛素惊厥实验报告.doc

组员：刘炎炎 吴颖川 邹琳 张雪娇 顾琦欣 一 实验目的 通过此次实验说明胰岛素具有降血糖的作用，同时也掌握了腹腔注射和皮下注射等常规的实验操作。 二 实验原理 胰岛素是调节机体血糖水平的激素之一。给动物注射大量胰岛素后，引起血糖降低，动物出现惊阙现象。 三 实验材料 小白鼠、注射器、胰岛素溶液（浓度为2 国际单位/毫升）、酸性生理盐水、生理盐水、50%葡萄糖溶液。 配制 胰岛素国际单位的换算：一个国际单位=0.03846?mg的标准人胰岛素所含的活性成份。 胰岛素溶液的配制：用pH2.5-3.5的酸性生理盐水配制胰岛素。 酸性生理盐水配制：将10 mL 0.1mol/L HCl 加入300毫升生理盐水中，调pH值为2.5-3.5。 四 实验步骤 1．取4只体重相近的健康小鼠，分为A、B两组并标记，A组为对照组，B组为实验组，每组2只。 2．将4只小鼠在实验前饥饿24小时，称量体重并记录。 3．给B组小鼠腹腔注射胰岛素溶液（0.1mL/10 g体重）。 腹腔注射：左手提起并固定小鼠，使小鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部，右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺，针头刺入皮肤后进针3mm左右，接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。 给A组小鼠腹腔注射等量生理盐水。 将两组动物放在室温下观察，比较两组动物的神态、姿势及活动情况。 当小鼠出现抽搐、翻滚等惊厥反应时，记录时间，并将其中一只立即皮下注射50%葡萄糖溶液（0.1mL/10 g体重）。 皮下注射：选项背或大腿内侧的皮肤。操作时，常规消毒注射部位皮肤，然后将皮肤提起，注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。 比较对照组动物、注射葡萄糖的动物、以及出现惊厥而未经注射葡萄糖的动物的活动情况，分析所得结果。 注意事项：若实验在冬天进行，注射胰岛素后，最好将动物放在30-37℃环境下保温，以加快反应的出现。 五 实验结果及结论 项目 实验对象 体重 胰岛素计量 小鼠神态、姿势及活动情况（1） 惊厥出现时间 是否注射葡萄糖 小鼠神态、姿势及活动情况（2） 实验组 A1 20g 0.2ml 注射后11 min 开始变得安静，眼睛时闭时开，31 min， 躲在角落不动，眼睛微微闭合1 h，动作吃力不协调，四肢瘫软的趴在笼子里，出现颤抖，1h23min，出现抽搐，惊厥（背拱起，四肢振颤） 1h23min 是 14min开始恢复爬行，但仍然很虚弱，腿脚不灵活，而后背可拱起，前肢离地，逐渐恢复 A2 19.2g 0.2ml 注射后15 min开始变得安静，目光呆滞，神色恍惚，40 min，躲在角落不动，眼睛微微闭合，身体整体中心下降1h12min，四肢瘫软向外翻开，出现颤抖，1h33min出现抽搐，惊厥（背拱起，四肢振颤）。 1h33min 否 平静，伏地，过8 min继续出现惊厥症状，而后平息，几乎一动不动，过几分钟再次惊厥。长时间不注射葡萄糖，导致昏迷。 对照组 B1 20g 0.2ml 和注射前无差别， 活动正常 是 和注射前无差别， 活蹦乱跳 B2 18.5g 0.2ml 和注射前无差别， 活动正常 否 和注射前无差别， 活蹦乱跳 结论 注射胰岛素后出现惊厥现象，而注射葡萄糖溶液之后小老鼠恢复正常。 说明胰岛素的作用是降低血糖。 六 问题 1 为什么用酸性生理盐水配制：抑制胰蛋白酶的活性，保证胰岛素的稳定性。 2 为什么腹腔注射时需要使小鼠头部略低于尾部？ 这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。 3 是否需要选择性别相同的小鼠？小鼠的性别对于实验结果是否有影响？ 是，会有影响。一般来说雄鼠的抵抗力要比雌鼠强，所以在发生惊厥的时间上会有所差异，而且，对雌鼠生活力的影响因素较多，所以优先考虑雄鼠。 从此次实验中可以看出，雄鼠较为活跃，对于刚接触的学生来说不利于注射，而且对于化学试剂的反应时间也会较雌鼠长，所以要选择性别相同的老鼠做实验。 说明：由于此次实验所用的小白鼠之前未经过饥饿处理，所以出现惊厥的时间较长。