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2 实验内容 卤虫卵孵化率的测定 Microsoft Word 文档
卤虫卵的质量判别
(一)外观质量
1.色泽与气味 :棕色或棕褐色,有光泽,无霉腥臭味
2.泥沙含量:大试管中装入1~2g卤虫卵→40ml清洁饱和卤水→→
3.破壳与碎壳:解剖镜→100枚卵→破壳卵和碎壳卵比例 (需做实验检测)
4.空壳:次氯酸盐溶壳法,计算空壳率(实验一)
5.含水率:优质卵→5%-8%→手感及凹陷→60℃恒重
6.大小判别:显微镜→;每克干轮虫卵→ (20万个/克)
7.细菌含量:一般微生物方法
(二)孵化性能(实验二)
实验一 卤虫卵的去壳
实验目的:
卤虫(Artimia satina L)是海水养殖中的一种重要的活饵料,主要用其初孵幼体。由于没有找到十分有效的分离方法。在使用时,大量卵壳和未孵化卵随幼体一起投喂到培养池中,不但影响水质,而且造成养殖对象吞食卵壳和未孵化卵后肠梗塞而死亡。因此,卤虫卵的去壳十分重要。本实验旨在让同学掌握卤虫卵去壳技术及去壳过程中卤虫卵的变化。
二、实验原理:
卤虫卵壳的外层主要成分是脂蛋白和正铁血红素。这些物质在强碱性条件下可以被一定浓度的次氯酸氧化除去。只剩下一层透明的卵膜。胚的活力不受影响。
去壳液由次氯酸盐,海水和pH稳定剂配置而成,已有经验表明:次氯酸盐中的每克有效氯可氧化2—2.5克卤虫卵的卵壳,去壳液的总体积按13 ml/g卵比例计算,并加入pH稳定剂0.13克NaOH/g卵或Na2CO3 /g卵。
三、实验器材:
天平1台,烧杯(500ml,100ml)各2只,量筒(200ml,100ml)各1个。NaClO,NaOH,海水,Na2S2O3溶液。KI溶液,温度计,凹玻片,解剖针,解剖镜,胶头滴管
四、方法与步骤:
去壳液的配置:
卤虫卵的去壳液通常用次氯酸钠溶液、氢氧化钠和海水按一定比例配制而成。次氯酸钠是氧化剂,氢氧化钠作为pH稳定剂,使pH控制在10以上,有利于去壳。由于不同品系的卤虫卵的卵壳厚度不一定相同,因此去壳液中要求的有效氯的含量也不尽相同。一般而言,每克干燥虫卵需使用0.5g有效氯和0.15g氢氧化钠,而去壳液的总体积按每克卵14ml的比例配置。
例如,用浓度为10%的次氯酸钠溶液作为去壳原料配置卵的去壳液,具体方法就是用80ml海水加1.3克NaOH,再加10%次氯酸钠溶液50ml就配成了10克去壳卵所需的去壳液。
漂白粉亦可使用。算法同上。但加入漂白粉易吸潮,使用前应进行有效氯的测定。
卵的去壳过程:
水处理:称取一定量的卵放入盛有海水或自来水的容器中,通气搅拌使卵保持悬浮状态;一小时后把卵放在孔径为120—150ul的筛网上洗净过滤。
去壳:把滤出的卵放入已配好的去壳液中,并搅拌。卵的颜色渐渐由咖啡色变为白色,进而橘红色。此过程最好在6—15分钟内完成)(与温度有关,超过10分钟会影响孵化率)在去壳过程中,为了防止温度过分升高(40℃),可用自来水浴降温。
清洗脱氯:将去壳卵溶液内加水若干*,倒入筛网上,用自来水或海水冲洗,直至无氯味,然后把经过冲洗的卵放入盛有海水或自来水的容器中(5—10ml水/1克卵),加入1—2%的Na2S2O3溶液,,去氯情况可用0.1N的KI溶液(16.6KI溶于1L蒸馏水中)和淀粉溶液检查。方法是:取少量已去过氯的卵,加入0.1N的KI溶液和淀粉溶液,如不出现兰色,表示氯已去净。 Cl2+2KI==2KCl+I2
去壳卵的处理:去氯后的去壳卵可以直接投喂,也可以孵化后投喂或放入-4℃冰箱中保存。
另取100粒已吸涨的卤虫卵,放在凹玻片上,滴加几滴去壳液,待完全去壳后统计去壳卵的数量,计算空壳率。
注意:1)去壳液要现配现用。
2)加水主要是冲稀次氯酸盐的浓度,以免腐蚀丝质筛网造成破洞。
五、结果与报告:
描述去壳过程中发现的现象,求算实验用卤虫卵的空壳率。
附海水配方:
下面是一个国外资料 介绍的人工海水配方,盐度3.34%, 适合于海水观赏鱼的饲养。 Mocledon的人工海水配方(盐度3.34%) 名 称? ? 分 子 式? ? 单位:克/升水 氯化钠? ? Nacl? ?? ???26.726 氯化镁? ? Mgcl2? ?? ?2.26 硫酸镁? ?Mgso4? ?? ?3.248 氯化钙? ? Cacl2? ?? ???1.153 碳酸氢钠 NaHCO3? ? 0.198 氯化钾? ?KCL? ?? ?? ?? ?0.721 溴化钠? ?NaBr? ?? ?? ? 0.058 硼酸? ? H3BO3? ?? ?? ?0.058 硅酸钠? ?Na2SiO3? ???0.0024 硅酸钠? ?Na2Si4O9? ?0.0015 磷酸? ???H3PO
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