[理学]7发酵工艺控制3.pptVIP

7.3发酵条件的影响及其控制 CO2对发酵的影响 一、描述微生物需氧的物理量 比耗氧速度或呼吸强度（QO2）：单位时间内单位重量的细胞所消耗的氧气，mmol O2·g菌-1· h-1 摄氧率(r)：单位时间内单位体积的发酵液所需要的氧量。mmol O2·L-1·h-1 。 r= QO2 .X 微生物对氧的需求 空气饱和度百分数： 发酵行业采用此方法表征溶氧。这只能在相似的温度、罐压、通气搅拌下进行比较。能反映菌的生理代谢变化和对产物合成的影响。 应用时，必须在接种前标定电极。方法是在一定的温度、罐压和通气搅拌下以消后培养基被空气100％饱和为基准。 二、溶解氧浓度对菌体生长和产物形成的影响 CCr:临界溶氧浓度, 指不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度。 CCr QO2 CL 一般对于微生物： CCr: ＝1～15%饱和浓度 例：酵母 4.6*10-3 mmol.L-1, 1.8% 产黄青霉 2.2*10-2 mmol.L-1, 8.8% 定义：氧饱和度＝发酵液中氧的浓度/临界溶氧溶度 所以对于微生物生长，只要控制发酵过程中氧饱和度1. 各种微生物的临界氧值以空气氧饱和度表示：细菌和酵母为3％～10％；放线菌为5％～30％和霉菌为10％～15％。 呼吸临界氧值不一定与产物合成临界氧值相同：卷须霉素和头孢菌素的呼吸临界氧值分别13％～23％和5％~7％；其抗生素合成的临界氧值则分别为8％和10％~20％。 生物合成临界氧浓度并不等于其最适氧浓度。 培养液中溶氧浓度的变化可以反映菌的生长状况。 二次生长… 生长衰退或自溶时会出现溶氧… 发酵过程中溶氧浓度的变化 即使是专性好气菌，过高的溶氧对生长可能不利。 原因：氧的有害作用是通过形成新生O，超氧化物基02-和过氧化物基022-，或羟基自由基OH-，破坏许多细胞组分体现的。有些带巯基的酶对高浓度的氧敏感。 培养过程中并不是维持溶氧越高越好： (1)、有些操作故障或事故引起的发酵异常现象能从溶氧的变化中得到反映。 例1：停搅拌，未及时开搅拌或搅拌发生故障，空气未能与液体充分混合均匀等都会使溶氧比平常低许多。 三、溶氧作为发酵异常的指示 (2)、中间补料是否得当可以从溶氧的变化看出。 例如：赤霉素发酵，有时会出现‘发酸’现象。这时，氨基氮迅速上升，溶氧会很快升高。这是由于供氧条件不强的情况下补料时机掌握不当和间隔过密，导致长时间溶氧处于较低水平所致。溶氧不足的结果，产生乙醇，并与代谢中的有机酸反应，形成一种带有酒香味的酯类，视为‘发酸’。 (3)、污染杂菌 遇到这种情况溶氧会一反往常迅速(一般2～5 h内)跌到零，并长时间不回升。 但不是一染菌溶氧就掉到零，要看杂菌的好气情况和数量，在罐内与生产菌比，看谁占优势。 有时染菌后溶氧反而升高。原因：生产菌受到杂菌抑制，而杂菌又不太需氧。 (4)、作为质量控制的指标 例：天冬氨酸发酵，前期好气培养，后期转为厌气培养，酶活大为提高。掌握转换时机颇为关键。当溶氧下降到45％时由好气切换到厌氧可提高酶活6倍。 供氧方面： dc／dt=KLa (c*－cL) (7-35) dc／dt为单位时间内发酵液溶氧浓度的变化，mmol02／(L·h)； KL为氧传质系数，m／h； a为比界面面积，m2／m3； c*为氧在水中的饱和浓度，mmol／L； cL为发酵液中的溶氧浓度，mmol／L。 四、供氧的调节 凡是使KLa和c*增加的因素都能使发酵供氧改善。 ①、提高氧分压：在通气中掺入纯氧或富氧； ②、提高罐压：但同时也会增加溶解C02的浓度，因它的溶解度比氧高30倍，这会影响pH和菌的生理代谢，还会增加对设备强度的要求； 增加c*的办法 ③、改变通气速率：作用是增加液体中夹持气体体积的平均成分。在通气量较小的情况下增加空气流量，溶氧提高的效果显著，但在流量较大的情况下再提高空气流速，对氧溶解度的提高不明显，反而会使泡沫大量增加，引起逃液。 理论上分析 KLa n d 通气量 提高搅拌，调节kla的效果显著 例 黑曲霉生产糖化酶 n 230 230 270 通气比 1:0.8 1:1.2 1:0.8 产量 1812 2416