紫外分光光度法测定黄瓜中维C的含量.doc

紫外分光光度法测黄瓜中维生素C的含量 一、主要仪器试剂 1、紫外分光光度计（UV-1800PC） 2、石英比色皿：1CM维生素 3、100ml容量瓶 4、榨汁机 5、维生素C标准储备液（1mg/ml) 6、新鲜黄瓜 二、实验方法 1、吸收曲线的绘制 以蒸馏水为参比，分别取标准溶液5 mL（200ug/mL）和制备好的黄瓜汁于100 ml容量瓶中，定容摇匀，在220-350nm范围进行光谱扫描，并确定最大吸收波长。由于维生素C易受氧化，要求现用现配。（见附图维生素C吸收曲线） 2、标准曲线的绘制 维生素C含量的测定：准确吸取1mg/mL的维生素C标准储备液50.00mL，在250mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为200ug/mL）。再分别准确移取1、2、3、4、5mL上述溶液，在100mL容量瓶中定容（浓度分别为2、4、6、8、10 ug/mL）。以蒸馏水为参比，于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度，制作标准工作曲线。（见附图维生素C标准曲线） 3、黄瓜试样的制备 称取已去皮并去籽黄瓜140g于榨汁机中榨汁，过滤约得75ml黄瓜汁。分别准确上述移取2.50ml、5.00ml黄瓜汁于100.0ml容量瓶中定容，稀释40倍、20倍。于最大吸收波长处测定试样溶液的吸光度，由标准曲线上查得未知液的浓度，平行测定3次。 三、结果计算 根据未知溶液的稀释倍数，求出未知物的含量。 计算公式： ——原始未知溶液浓度，μg/mL； ——查出的未知溶液浓度，μg/mL； ——未知溶液的稀释倍数。标准溶液标准溶液浓度： 标准溶液浓度： 测量波长：_nm 溶液代号 吸取标液体积mL） ρ（μg/mL） A 0 0.00 0.00 0.000 1 1.00 2.00 0.133 2 2.00 4.00 0.251 3 3.00 6.00 0.373 4 4.00 8.00 0.499 5 5.00 10.00 0.607 2、未知液的配制 稀释次数 吸取体积（mL） 稀释后体积（mL） 稀释倍数 1 5.00 100.00 20 2 2.50 100.00 40 3 3、.未知物含量的测定 平行测定次数 1 2 3 A 0.484 0.484 查得的浓度μg/mL) 7.844 7.844 7.844 原始试液浓度μg/mL) 156.88 156.88 156.88 原始试液浓度μg/mL) 156.88 结果讨论： 黄瓜汁的颜色较深，过滤仍有浑浊，离心可能效果好些。 初步实验表，明酸度对吸收波长有影响， PH为6左右较稳定 . 1