《》高考一轮生物复习选修1-3.pptVIP

考点二 PCR技术和分离蛋白质? 1.细胞内DNA复制与PCR技术的比较: 体外迅速扩增 边解旋边复制, 半保留复制 特点 无转录、需加入两种引物 伴有转录、 产生引物 是否有 转录 耐高温的TaqDNA聚合酶 解旋酶、DNA聚合酶 酶 不需ATP提供能量 ATP提供能量 能量 细胞外 细胞内 场所 不 同 点 PCR扩增 DNA复制 项　目 都需要与模板相结合的引物 引物 DNA 模板 严格遵循碱基互补配对原则 复制原理 四种脱氧核苷酸 原料 相 同 点 需要严格控制温度 变化的温控设备 无 设备 需要人为控制 不需要 缓冲液 30多次 受生物体自身控制 循环 次数 不 同 点 PCR扩增 DNA复制 项　目 2.PCR过程: (1)变性:当温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚为单链。 (2)复性:温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 (3)延伸:温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 3.PCR技术和分离蛋白质的比较: 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 解决了DNA研究中材料 不足的问题 实验 意义 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 获得大量DNA 实验 结果 样品处理和粗分离→凝胶色谱操作 变性→复性→延伸 实验 过程 依据相对分子质量的大小不同来分