[生物学]分子生物学绪论.pptVIP

基因敲除 RNAi 基因芯片 基因转导 功能基因组学（Functuional genomics）又往往被称为后基因组学（Postgenomics），它利用结构基因组所提供的信息和产物，发展和应用新的实验手段，通过在基因组或系统水平上全面分析基因的功能，使得生物学研究从对单一基因或蛋白质得研究转向多个基因或蛋白质同时进行系统的研究 基因组时代后基因组时代 人类仅5%编码 艾弗里最为人称道的贡献是在遗传学方面。1944年，他与他的同事麦克劳德（MacLeod）和麦卡蒂（McCarty）提供了DNA是遗传物质的第一个直接实验证据，从而导致1953年沃森－克里克提出DNA双螺旋结构模型，由此诞生了分子遗传学，开创了生命科学的新纪元。自从1916年布里吉斯（Bridges）用极其严密的实验证明基因是位于染色体上的物质实体以后，许多生物学家都想进一步解决基因的物质本性问题。尽管富尔根（Feulgen）于1924年已经证明DNA是染色体的一个主要组分，然而，由于20世纪20年代分析化学精确程度的限制,?使当时的核酸化学权威莱文（Levene）错误地认为DNA分子中含A、G、C、T这4种不同核苷的4种核苷酸是等量的，进而又错误地提出DNA分子结构的“四核苷酸假说”,?即DNA分子是由这4种核苷酸相互连接构成的一个“四核苷酸”；即使后来已查明DNA是很大的分子，“四核苷酸假说”却直到20世纪40年代仍被普遍接受，只不过修正为DNA是由这样的“四核苷酸”为单元再聚合而成的大分子。很难设想这样一种单调重复的分子结构如何体现基因的极大多样性。 肺炎球菌(Diplococcuspneumonoae)有许多不同的菌株(strains)，但只有光滑型(S)菌株能引起人的肺炎和小鼠的败血症(septicemia)。这种菌株的细菌细胞外面有多糖类的胶状荚膜保护层，使它们不会被宿主的防御机制所破坏。当这种细菌生长在合成培养基上时，每个细菌长成一个明亮、光滑的菌落。其他一些菌株没有荚膜，不会引起疾病，长成粗糙型(R)菌落。 (Osward Avery)等人(1944)从S型细菌中分别抽提出DNA、蛋白质和荚膜物质，并把每一种成分同活的R型细菌混合，悬浮在合成培养液中。结果发现只有DNA组分能够把R型细菌转变成S型细菌。S型细菌有一种物质或转化因素(transformingprinciple)进入了R型细菌，引起R型细菌发生了稳定的遗传变异。 由此说明RNA、蛋白质和荚膜多糖均不引起转化，而DNA却能引起转化。如果用DNA酶处理DNA后，则转化作用丧失。 加热温度是60度 实质是S型的DNA或基因与R型活细菌DNA之间重组,使后者获得了新的遗传信息。 外源DNA分子一旦找到它的内源同源体，这两个分子就可进行遗传交换了。交换的结果是使外源DNA被整合，而使同源的内源DNA分子从R型细菌的DNA中排斥出去，从而产生由R型细菌变为S型细菌的遗传转化。 1.供体细胞DNA浓度。浓度越高，转化率越高。 2.两种细菌的亲缘关系。亲缘关系越近，转化越容易。 3.受体菌状态。只有处于感受态细胞才能被转化 实验设计思路：设法将DNA与其他物质分开，单独地、直接地研究它们各自不同的遗传功能。 肺炎双球菌转化实验的结论：加热杀死的S菌中有一种“转化因子”，能使R菌转化为S菌，使小鼠死亡。 埃弗雷、麦克利奥特及麦克卡蒂等人的体外转化实验：证明DNA是遗传物质，蛋白质不是遗传物质。 特别提示：R型菌转化成S型菌的原因是S型菌DNA与R型菌DNA实现重组，表现出S型菌的性状，此变异属于基因重组。 转化是指受体细胞直接摄取供体细胞的遗传物质（DNA片段），将其同源部分进行碱基配对，组合到自己的基因中，从而获得供体细胞的某些遗传性状，这种变异现象，称为转化。 构成蛋白质的氨基酸中，甲硫氨酸和半胱氨酸含有硫，DNA中不含硫，所以硫只存在于T2噬菌体的蛋白质。相反，磷主要存在于DNA中，至少占T2噬菌体含磷量的99%。宿主菌细胞分别放在含35S或含32P的培养基中。宿主细胞在生长过程中就被35S或32P标记上了。然后用噬菌体去感染分别被“S或”P标记的细菌，并在这些细菌中复制增殖。宿主菌裂解释放出很多子代噬菌体，这些子代噬菌体也被标记上35S或32P。被35S标记的噬菌体所感染的宿主菌细胞内很少有35S，而大多数35S出现在宿主菌细胞的外面。也就是说，35S标记的噬菌体蛋白质外壳在感染宿主菌细胞后，并未进入宿主菌细胞内部而是留在细胞外面。被32P标记的噬菌体感染宿主菌细胞后，测定宿主菌的同位素，发现32P主要集中在宿主菌细胞内。所以噬菌体感染宿主菌细胞时进入细胞内的主要是DNA。由此可以得出结论：噬菌体注入宿主菌细胞内的物质是DNA，释放出来的是跟原先感染细菌细胞一样的噬菌体。可见在噬菌