色谱分析法概述分析化学课件1.pptVIP

1 色谱分析法概述 广西医科大学药物分析教研室 色谱法的创始人 －俄国植物学家 茨维特(M.Tswett) 色谱法的由来 在茨维特的实中： 装有CaCO3的玻璃管 ——色谱柱 CaCO3 ——固定相 纯石油醚 —— 流动相 色谱法的由来 在该实验中，碳酸钙上混合色素被分成不同色带的现象，像一束光线通过棱镜时被分成不同色带的光谱现象一样，因此茨维特把这种现象称为色谱，相应的分离方法称为色谱法（色层法，层析法） Tiselius, A.W.K. Martin, A.J.P. Synge, R.L.M. 1948年 Nobel 化学奖 1952年 Nobel 化学奖 吸附色谱与电泳 分配色谱 1931年 库恩 奥地利化学家 胡萝卜素植物色素分离 20世纪30年代 离子交换色谱建立 1940年 吸附色谱与电泳相结合 1941年 分配色谱创立 1952年 气相色谱法建立 1968年 高效液相色谱法建立 1975年之后 离子色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电泳、场流动分级分离 Tiselius, A.W.K. Martin, A.J.P. Synge, R.L.M. 1948年 Nobel 化学奖 1952年 Nobel 化学奖 吸附色谱与电泳 分配色谱 色谱法的特点 优点：“三高”、“一快”、“一广” 第一节　色谱过程的基本原理 一、色谱过程 二、色谱流出曲线和有关概念 三、分配色谱与色谱分离 1.互不相溶的两相（流动相、固定相）； 2.被分离组分在两相之间作相对运动 色谱法实质是分离 分离依据： 各组分在两相之间作用力不同　(吸附能力　分配系数　离子交换能力大小排阻能力　其他亲合作用) 各组分差速异行→分离 填充柱分配色谱分离过程 第一节　色谱过程的基本原理 一、色谱过程 二、色谱流出曲线和有关概念 三、分配色谱与色谱分离 二、色谱流出曲线和有关概念 色谱流出曲线和色谱峰 色谱流出曲线 基线 色谱峰 对称因子 一．流出曲线和色谱峰 色谱图 被分析试样从进样开始，经 色谱柱分离，到各组分全部流过检测器 在此期间所记录下来的响应信号随时间而变化的曲线（分布的图像），称为色谱流出曲线或色谱图。 基线 在色谱操作条件下仅有流动相通过检测器时，反映检测器噪声随时间变化的曲线。 稳定的基线是一条直线。 色谱峰 在一定色谱条件下，组分通过检测器时，响应信号随时间而变化的曲线称为色谱峰。 色谱过程按近理想条件和分配系数恒定时的流出曲线为对称的高斯分布曲线，对应的高斯分布函数为： 不正常色谱峰有两种：判断一个色谱峰是正常还是不正常，用fs衡量：(拖尾峰与前延峰) 　fs ＝Ｗ0.05h／2A=(A+B)/2A 　  fs =0.95 ～1.05为对称峰 ＜ 0.95 为前延峰 ； ＞ 1.05 为拖尾峰.　 色谱保留值 表明色谱峰在色谱图中的位置（可用时间t、体积V、距离d表示）。它是由色谱分离过程中的热力学因素所决定的。 保留值的定义 1.保留时间 从进样开始到色谱峰最大值出现时所需的时间 保留值的定义 2.死时间 不被固定相保留的组分(K=0)，从进样开始到色谱峰最大值出现时所需的时间 。 实际上为流动相流经色谱柱所需要的时间： 保留值的定义 3.调整保留时间 组分的保留时间与死时间之差 保留值的定义 4.保留体积 从进样开始到色谱峰最大值出现时所需通过的流动相的体积 5.死体积 6.调整保留体积 7.相对保留值 某一组分与基准物