[预防医学]卫生微生物学-第四章方法卫检2012.ppt

卫生微生物检测的特点及基本原则 卫生指示微生物 卫生微生物研究和检测的方法 卫生微生物研究和检测方法的前景 4、防污染 避免采样时外界微生物对样品的新污染：所有采样用具、容器需严格灭菌，并以无菌操作采样。 （二）样品的运送原则 * * 根据生长温度的差异，将能在37?C生长的称为总大肠菌群，而在44.5?C仍能生长的大肠菌群称为耐热大肠菌群(thermo-tolerant coliform group) 或粪大肠菌群（faecal coliform Fc），耐热大肠菌群的主要成员是埃希氏菌属的菌。 * * 大肠杆菌（Escherichae coli）： 普遍存在于人和动物的肠道内（新鲜粪便中每克可达109 CFU），近年来随着测定新方法的发现和建立，大肠杆菌作为粪便污染的指示菌的应用越来越多。 利用大肠杆菌产生的葡萄糖苷酸酶，分解吲哚葡萄糖苷酸，产生有色物质，而使大肠杆菌菌落显色，对大肠杆菌数进行测定。 * * 作为粪便污染的指示菌，大肠杆菌检出的意义最大，其次是耐热大肠菌群，总大肠菌群的检出意义略差一些。 GB/T 4789.3-2008大肠菌群MPN计数 初发酵 复发酵 大肠菌群月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤发酵结果 阳性 阳性 阳性 阴性 煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤 接种 样本 阴性 阳性 大肠菌群煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤发酵结果 GB/T 4789.3-2008新增大肠菌群平板计数 平板计数 证实试验 典型菌落： 紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大 大肠菌群在结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）上的生长情况 GB/T 4789.3-2008新增大肠菌群PetrifilmTM测试片法 准备PetrifilmTM测试片 接种1ml样本液 缓慢盖上上层膜 用压板轻压培养基 样本接种结果 红色有气泡的菌落确认为大肠菌群 大肠杆菌VRB-MUG平板计数法 检验时用已知MUG阳性菌株（如大肠杆菌ATCC25922）和产气肠杆菌（如ATCC13048）做阳性和阴性对照 * * 实验室生物安全级别 * * 感染性微生物的危险度等级分类 危害等级I (低个体危害，低群体危害) 不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。 危害等级Ⅱ (中等个体危害，有限群体危害) 能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。 * * 感染性微生物的危险度等级分类 危害等级III (高个体危害，低群体危害) 能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体。 危害等级Ⅳ (高个体危害，高群体危害) 能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播的病原体。 * * 实验室可以分为 基础实验室 —— 一级生物安全水平（BSL-1) 基础实验室 —— 二级生物安全水平（BSL-2) 防护实验室 —— 三级生物安全水平（BSL-3) 最高防护实验室 —— 四级生物安全水平（BSL-4) 根据操作不同危险度等级微生物所需的实验室设计特点、建筑构造、防护设施、仪器、操作以及操作程序来决定实验室的生物安全水平。 * * 传染病分类——传染病防治法 甲类传染病是指：鼠疫、霍乱。（2） 乙类传染病是指：传染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎、脊髓灰质炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血热、狂犬病、流行性乙型脑炎、登革热、炭疽、细菌性和阿米巴性痢疾、肺结核、伤寒和副伤寒、流行性脑脊髓膜炎、百日咳、白喉、新生儿破伤风、猩红热、布鲁氏菌病、淋病、梅毒、钩端螺旋体病、血吸虫病、疟疾。（25） * * 传染病分类 —— 传染病防治法 丙类传染病是指：流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、急性出血性结膜炎、麻风病、流行性和地方性斑疹伤寒、黑热病、包虫病、丝虫病，除霍乱、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病、手足口病。（11） 对乙类传染病中传染性非典型肺炎、炭疽中的肺炭疽和人感染高致病性禽流感，采取本法所称甲类传染病的预防、控制措施。 * * 传染病分类 —— 根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类： 第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。 第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。 病原微生物实验室生物安全管理条例 * * 传染病分类 —— 第三