研究肝癌中net-1基因与p27及其磷酸化降解分子的相关性教材幻灯片.pptVIP

研究肝癌中NET-1基因与p27及其磷酸化降解分子的相关性及对癌预后的影响;; NET-1与NET-2到NET-7一起统称为NET-X,它们是由Serru等于2000年在EST 数据库中发现的7 个新的含4 次跨膜蛋白超家族( transmembrane 4 superfamily 或tetraspan family, 简称TM4SF) 的成员。 ; p27作为细胞周期重要负性调控因子,受多种因素调控。细胞外信号调节激酶(ERK) 是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)中一条主要和经典的并与人类癌症关系最为密切的途径,p27蛋白是ERK信号通路下游的重要分子。p27的基因突变非常罕见,对p27的功能调控主要发生于转录后阶段,通过蛋白磷酸化修饰来发挥其生物学效应。p27分子内存在数十个潜在的磷酸化位点,其中以N端第10位丝氨酸(S10)及C端第187位苏氨酸(T187)最为重要,占p27蛋白总磷酸化水平70﹪以上。p-p27T187可启动S期激酶相关蛋白2(Skp2)分子介导的p27多聚泛素化及随后降解 。有证据显示JAB1与p27的出核转运有关。??能够促进p27从胞核向胞浆的移位,加速p27泛素蛋白酶体途径的降解 。;1、构建重组表达质粒 NET-1siRNA、myc-NET-1和 pEGFP-myc-p27 (WT) 。 2、细胞培养与转染 3、Western blot检测蛋白表达 4、免疫共沉淀分析NET-1与p27的相互作用关系 5、免疫组化检测 6、临床病例与预后分析;二、结果;;;;;(2)Kaplan-Meier生存曲线 ;(3)Cox比例风险模型多因素生存分析;;; ; Thank you ！