实验四病原菌的分离和一鉴定
实验三 肠道菌的分离培养与鉴定 目的要求: 1.熟悉选择和鉴别培养基的原理; 2.了解大肠杆菌的主要培养特性; 3.熟悉大肠杆菌和沙门氏菌的常规鉴定方法; 基本原理 肠道菌大多为革兰氏阴性小杆菌,采用一般染色和分离培养难以鉴别,故须采用鉴别和生化试验培养方能鉴定。不同种类的肠道菌,产生的酶类和活性不同,在代谢过程中,产生分解产物和合成产物各不相同,利用细菌的生化特性,以生物化学的方法来鉴别细菌称为生化试验。 细菌分离培养和移植应注意下列事项: 1.选择适当培养基和培养条件。分离培养前应充分考虑所分离的细菌的特性,选择适合其生长的培养基以及所需的气体与培养温度(病原菌一般为37℃)等。 2.严格无菌操作、防止污染。培养基和一切用具必须彻底灭菌;操作时必须靠近火焰,接种环必须经火焰彻底灭菌;操作完毕后,防止再让培养基接触外界空气,接种环通过酒精灯火焰灭菌。 3.防止过热的接种环杀死需要分离培养的细菌。接种环在烧灼灭菌后,不能立即钓取细菌材料,否则会将细菌烫死;另外,还应注意防止已钓取菌料的接种环,不慎通过火焰而将细菌杀死。 4.纯化分离菌。初代分离时若长出两种以上菌落,应进一步挑选可疑菌落进行纯培养。 一、肠道菌的分离培养法 (一)需氧菌分离培养法 1.平板划线法 此法为最常用的细菌分离培养方法,其原则在于使被检材料充分分散,以
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