原生质体法介导真菌遗传转化的研究进展-植物保护.PDFVIP

　 犘犾犪狀狋犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀 原生质体法介导真菌遗传转化的研究进展  沈慧敏， 李 超， 高 利 ， 刘太国， 刘 博， 陈万权 　 　 　 　 　 　 　 　 （中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京　１００１９３） 摘要 原生质体法介导真菌遗传转化体系是实现大规模随机、定点突变和菌种改良的方法之一，为研究真菌致病性 　 和侵染机制奠定了基础。原生质体法构建转化体系的步骤包括原生质体的制备、转化与再生，其中关键是原生质体 的制备，通常采用酶解法破除细胞壁获得原生质体，其获得率直接影响转化效率。转化通常借助于聚乙二醇（ ） ＰＥＧ 介导、电击或限制性内切酶法完成，其中ＰＥＧ介导的原生质体转化法较传统，技术较成熟；电击法操作较简单；限制 性内切酶（ ）介导的整合转化，因其转化效率较高，可产生大量稳定的转化子，正被越来越多地应用于丝状真 ＲＥＭＩ 菌的遗传转化。 关键词 原生质体； 制备与再生； 介导； 电击； ； 转化子 ＰＥＧ ＲＥＭＩ 　 　 　 　 　 　 中图分类号： 文献标识码： ： ／ Ｑ７８ Ａ 犇犗犐 １０．３９６９．ｉｓｓｎ．０５２９ １５４２．２０１７．０２．００４ 　 　　 　 　　 　 ｊ 犚犲狊犲犪狉犮犺 狉狅狉犲狊狊犻狀狋狉犪狀狊犳狅狉犿犪狋犻狅狀狅犳犳狌狀犻犿犲犱犻犪狋犲犱犫 狉狅狋狅犾犪狊狋狊 狆 犵 犵 狔狆 狆 ， ， ， ， ， 犛犺犲狀犎狌犻犿犻狀 犔犻犆犺犪狅 犌犪狅犔犻 犔犻狌犜犪犻狌狅 犔犻狌犅狅 犆犺犲狀犠犪狀狌犪狀 　 　 　 犵 　 　 狇 （ ， 犛狋犪狋犲犓犲犔犪犫狅狉犪狋狅狉 狅狉犅犻狅犾狅 狅犘犾犪狀狋犇犻狊犲犪狊犲狊犪狀犱犐狀狊犲犮狋狊犘犲狊狋狊 犐狀狊狋犻狋狌狋犲狅犘犾犪狀狋 狔 狔犳 犵狔犳 犳 ， ， ， ） 犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀 犆犺犻狀犲狊犲犃犮犪犱犲犿 狅犃狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊 犅犲犻犻狀 １００１９３ 犆犺犻狀犪 狔犳 犵 犼犵　 犃犫狊狋狉犪犮狋 犜犺犲狌狊犲狅犳狉狅狋狅犾犪狊狋犿犲犱犻犪狋犲犱 犲狀犲狋犻犮狋狉犪狀狊犳狅狉犿犪狋犻狅狀狊狊狋犲犿犻狊狅狀犲狅犳狋犺犲犿犲犪狀狊狋狅犪犮犺犻犲狏犲犾犪狉犲狊犮犪犾犲 　 狆 狆 犵 狔 犵 狉犪狀犱狅犿犻狕犲犱犪狀犱狊犻狋犲狊犲犮犻犳犻犮犿狌狋犪犲狀犲狊犻狊犪狊狑犲犾犾犪狊狊狋狉犪犻狀犻犿 狉狅狏犲犿犲狀狋犻狀犳狌狀犻．犐狋犾犪