[理学]《酶工程》课件-绪论.ppt

* 绪 论 本章主要内容 一、酶的基本概念与发展史 二、酶的活力测定 三、酶的生产方法 四、酶工程发展概况 绪 论 一、酶的基本概念与发展史 （一）基本概念 酶是具有生物催化功能的生物大分子，按照其化学组成，可以分为蛋白类酶（P酶）和核酸类酶（R酶）。 绪 论 一、酶的基本概念与发展史 （二）酶的发展史 人们对酶的认识经历了一个不断发展、逐步深入的过程，大致分为四个阶段： 1、（1833年以前）酶者，酒母也。 2、 （1833-1926）酶是生物体产生的具有生物催化功能的物质，但尚未搞清楚究竟是哪一类物质。 3、（ 1926-1982）酶是具有生物催化功能的蛋白质。 4、 （1982-今）RNA也具有催化活性。 绪 论 二、酶的活力测定 （一）酶活力的概念 1、酶活力：是指在一定条件下，酶所催化的反应初速度。 在外界条件相同的情况下，反应速度越大，酶活力越高。 2、酶催化反应速度表示方法 根据中间产物学说，酶催化反应速度，用单位时间（t）内底物（S）的减少量或产物（P）的增加量表示，即： 绪 论 二、酶的活力测定 （二）酶活力的测定 1、测定方法 酶活力测定方法多种多样，一种酶可能有多种测定方法，如光学测定法、化学测定法、气体测定法等。 根据实际情况选用，要求快速、简便、准确。 2、测定阶段 （1）在一定的条件下，酶与作用底物反应一段时间。 （2）测定反应液中底物或产物的变化量。 3、测定步骤 绪 论 二、酶的活力测定 （二）酶活力的测定 1、测定方法 2、测定阶段 （1）根据酶催化的专一性，选择适宜的底物，并配制成一定浓度的底物溶液。 （2）根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的条件。 3、测定步骤 （3）在一定的条件下，将一定量的酶液与底物溶液混合均匀，适时记下反应开始的时间。 （4）反应到一定的时间，取出适量的反应液，运用各种生化检测技术，测定产物的生成量或底物的减少量。 绪 论 二、酶的活力测定 世界各地实际应用的酶活力单位的定义各不相同。由于测定方法和使用习惯不同，同一种酶往往有几种不同的酶活力单位。 在特定条件下，每lmin催化1umol的底物转化为产物的酶量定义为1个国际单位（IU）。 1、酶活力单位的概念 （三）酶活力单位 酶活力的高低，用酶的活力单位数来表示。 （2）卡特（kat） 在特定条件下，每1s催化1mol底物转化为产物的酶量定义为1卡特（kat）。 1kat=6×107IU （1）国际单位（IU） 为统一起见，1961年，国际生物化学与分子生物学联合会规定了国际单位（IU）。 国际上另一个常用的酶活力单位是卡特（kat）。 绪 论 二、酶的活力测定 为了比较酶制剂的纯度和活力的高低，常采用比活力,这一概念是1964年国际生化学会规定的，是酶纯度的一个指标。 酶的比活力：是指在特定的条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。 酶比活力=酶活力（单位）/mg（蛋白或RNA） 2、酶的比活力的概念 （三）酶活力单位 酶活力的高低，用酶的活力单位数来表示。 绪 论 二、酶的活力测定 （四）酶的转换数与催化周期 1、酶的转换数 酶的转换数Kp，又称为摩尔催化活性，是酶催化效率的一个指标。 酶的转换数是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。 酶的转换数Kp 底物转变摩尔数（mol） 酶摩尔数.分钟（mol. min） 酶的活力单位数（IU） 酶微摩尔数（umol） = = 绪 论 二、酶的活力测定 （四）酶的转换数与催化周期 2、酶的催化周期 酶的催化周期（T）是指酶进行一次催化反应所需的时间。 酶的催化周期（T）是酶的转换数的倒数。即T=1/Kp 绪 论 二、酶的活力测定 （五）固定化酶的活力测定 1、固定化酶的概念 指与水不溶性载体结合，在一定的空间范围内起催化作用的酶。 2、固定化酶的活力测定 固定化酶由于有载体的保护，其性质与游离酶的性质有区别（在第六章第一节讲述），所以测定方法不同 。 常用的测定方法： （1）振荡测定法 （2）酶柱测定法 （3）连续测定法 绪 论 二、酶的活力测定 （五）固定化酶的活力测定 3、固定化酶的比活力测定 （1）比活力的概念 是指每g干固定化酶所具有的酶活力单位数，即单位／mg干固定化酶。