[医学]第17章 CD and AM免疫学.pptVIP

白细胞分化抗原和黏附分子的检测 主要内容 白细胞分化抗原的检测 白细胞分化抗原检测的意义 粘附分子的检测 粘附分子检测的意义 第一节 白细胞分化抗原测定 一、人类白细胞分化抗原 人类白细胞分化抗原：免疫细胞在分化成熟及活化过程中表达的膜分子。 CD (cluster differentiation)：来自不同实验室的单克隆抗体所识别的同一种分化抗原归为同一分化群。 白细胞分化抗原的特征 细胞膜表面分子； 在细胞分化、成熟、活化的不同阶段表达； 不同的分化抗原可表达于同一类细胞，同一种分化抗原可表达于不同类细胞； 可作为细胞分类、分群、分型的表面标志； 可作为鉴定细胞来源、分化阶段、活化状态的依据。 二、白细胞分化抗原测定 （一）荧光免疫技术 （二）免疫细胞化学法 （三）抗体致敏细胞花环法 （一）荧光免疫技术 Flow cytometry （二）酶免疫细胞化学法 APAAP酶免疫桥联法 ABC染色法 三、白细胞分化抗原测定的应用 （一）血液病的诊断和治疗 （二）血栓与出血性疾病的诊断和治疗 （三）艾滋病的诊断和治疗 （四）疾病发病机制的研究 第二节 粘附分子的测定 一、什么是黏附分子 二、细胞表面粘附分子的测定 三、可溶性粘附分子的测定 四、细胞内粘附分子的基因及基因表达测定 一、什么是黏附分子？ 是一类介导细胞间或细胞与细胞外基质间互相接触和结合的分子，多为跨膜型糖蛋白。 细胞表面粘附分子和可溶性粘附分子。 粘附分子的种类 1. 选择素家族 (selectin) 2. 整合素家族 (integrin family) 3. 免疫球蛋白超家族 (IgSF) 4. 钙依赖性黏附素家族 (cadherin) 5. 粘蛋白样家族 (mucin-like family) 二、细胞表面粘附分子的测定 （一）酶免疫组织化学方法 （二）荧光免疫组织化学方法 （三）酶免疫测定 （四）时间分辨荧光免疫测定法 （五）流式细胞术 三、可溶性粘附分子（sAM）的测定 可溶性粘附分子的来源： 细胞表面的AM经酶解脱落释放入血液或局部组织液中； 细胞内粘附分子mRNA有不同的剪接方式。 可溶性黏附分子的测定方法 1、ELISA 2、RIA 3、化学发光法、时间分辨荧光 测定法等 五、 粘附分子测定的应用 小 结 熟悉CD分子和粘附分子检测的方法； 了解CD分子和粘附分子检测的意义 思考题 总结并比较细胞膜分子和可溶性分子检测的方法。 1．炎症 2．肿瘤浸润和转移 3．器官移植排斥 4．自身免疫病 5．免疫缺陷病 6．肾脏疾病 7．糖尿病慢性并发症的关系 * * 一、 什么是白细胞分化抗原 二、 白细胞分化抗原测定 二、 白细胞分化抗原测定的应用 CD molecules associated with reco-gnition,adhesion and activation of T cell ② ③ ④ ⑤ ︱ MHC-Ⅰ ︱ MHC-Ⅱ ︱ B7 ︱ CD40 ︱ CD58 ︱ CD2 ① CD molecules associated with recognition, adhesion and activation of B cell ① ② ③ ④ ① Fc receptor of immunoglobulin ? ? (???2) Fc?R ? IgFc段通过与FcR结合介导Ig的生理功能或参与病理损伤 *介导ADCC(CD64,CD16,CD89)和吞噬作用(CD64,CD32,CD16,CD89) *B细胞表达的FcrRⅡ(胞浆区有ITIM）介导免疫抑制作用 *Fc?RⅠ介导Ⅰ型超敏反应 ,Fc?R Ⅱ调节IgE的合成 ?属于CD分子的Fc受体有Fc?R、Fc?R 、 Fc?RⅡ Immunofluorescence microscopy Laser Scanning Confocal Microscopy 3. Flow cytometry Immunofluorescence microscopy Cholangiocarcinoma cell express CD80-GFP 共聚焦显微镜结果照片 白血病免疫分型 CD2， CD3， CD5，CD7 T细胞系 CD10， CD19， CD20 B细胞系 CD13， CD14 髓系细胞 CD34 干细胞 表面CD分子 细胞类型 AIDS患者CD4和CD8阳性细胞检测 淋巴细胞向外周淋巴器官的归巢 粘附分子与临床 白细胞粘附缺