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2018-04-21 发布于天津
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三步法扩增高变异区E5F

遗传 ! !# $ 技术与方法 !#$%’( )*++- ! # $$! $$%!’ ! ,. ! 三步法扩增高变异区E5F 邱钢曾庆韬金珊钱远槐 ! ! ! ! ! ! $ 湖北大学生命科学院武汉 $#%! ! 摘要分子进化研究中所遇到的一个常见问题是某些基因的目标区域进化较快而难以用特定引物在不同种属间 ! 进行有效扩增而这将影响到整个实验的进程和全部结果的综合分析虽然巢式和半巢式等能显著提高扩增 $ ( G=H $ $ ( 的特异性但应用于高变异区的扩增结果仍是杂带多或涂抹严重不能满足后续实验需要在果蝇 $ 基因 /01’% 的研究中需要扩增不同属及黑腹果蝇种组不同种亚组的相关片段由于该区域变异较显著常用扩增方法对 $ E5F $ ( $ 大部分材料的效果都很不理想实验创造性组合了一套经济实用的扩增方法即巢式或半巢式 G=H结合定向片段胶回收技术后再扩增的三步扩增法得到了令人满意的扩增结果为下一步的克隆测序等研究创造了必 E5F $ $ ) 要条件( ! * * 关键词高变异区 G=H 三步法中图分类号! 文献标识码! 文章编号! ! I’ F !’#J*!!’ #J$$!J’ ! ! ! ! ! ! !#$$%$ ()*#+, -.).0 23.4567*-7.0 ’ ’ / 1 1 8$ .*0*)9:+ 1 $ $ $ IKLM68 N@5M I78AO6. PK5+68IKF5Q,68AR,67 D D ! $ $ $ /02345 789+8*(2+*-2* !3:*+;-+*=+5 ?3@0-$#%! A@+-0 6 6 # +;(#4