第十一章微生物遗传.PDFVIP

第十一章 微生物遺傳 微生物的遺傳物質與基因重組 A. 微生物適合做遺傳研究的原因 1. 生活史短 、後代多 、繁殖容易 2. 微生物遺傳物質大多單套 ，若突變很容易觀察出來 。 3. 微生物細胞內易發生基因重組 。 B. 名詞解釋 ： 1. 異營型 ：必須吸收有機物才能生存 。 2. 自營型：吸收二氧化碳即可生存。 3. 基本培養基 ：只含一些無機鹽 4. 完全培養基 ：加上有機物 5. 添加培養基 ：基本培養基加上某一些營養物 6. 菌株 ：由單一細菌分裂繁殖的細胞群 7. 菌斑 ：噬菌體吞噬細胞 ，細胞死亡並繁殖出噬菌體（透 明狀） 8. 平板複印技術 ：如下圖 ，可快速篩選出所要的菌株 。 微生物的遺傳物質與基因重組 B. 名詞解釋 ： 9. 原始營養型 ：可在基本培養基生長的生物 10. 營養缺陷型 ：必須在基本培養機加入某些營養才能生長 微生物的遺傳物質與基因重組 Ｃ. 原核與病毒的遺傳物質 1. 原核遺傳物 ： a. 主要染色體 ：以大腸桿菌為例，雙股環狀DNA摺疊扭 轉加上RNA與蛋白質圈環超螺旋 （如下圖） b. 質體 ：主要染色體以外的遺傳物質。 2. 病毒的遺傳物質 ： 單股/雙股環狀，單股/雙股線狀。 DNA病毒、RNA病毒、噬菌體。 微生物的遺傳物質與基因重組 D. 細菌可經由四種方式獲得外來的基因，產生基因重組的現 象。 1.  轉化 2.  接合 3.  轉導 4.  性導 二、轉化 1.  定義 ：微生物吸收外來的DNA, 變成自己的DNA 2.  條件 ：外來的DNA需雙股、至少有1-2萬核苷酸、表面要有 受器蛋白。 3.  無論是單股或雙股進入細胞中，當外來DNA要插入細菌 染色體中，是以單股經互換插入，再以插入的為模，製 出另一股。 4.  外來DNA進入細菌是非專一性的，但要插入染色體是專 一性的。 ㄦ - 二、轉化 5. 利用轉化來定基因順序 兩個連鎖的記號基因，外來的DNA(trp+trp+), 細菌的DNA為 (trp-trp-)。單一轉化(trp+trp-)共524個菌落，雙重轉化有367 個菌落。則trp+與trp-的距離= 524 / (524+367) = 58.8 % 三、接合 1.  定義 ： 兩隻細菌接觸產生接合管，遺傳物質傳遞。供給者 傳遞給接受者。供給者體內具有F質體 (F代表具生殖力)。 接合後突變的基因稱為“記號基因”。（重組之後可能可以 適應環境而生長，見下圖。） 2.  F質體 ：F+具“性纖毛”，可將F+與F-拉在一起。當F+插入 細菌染色體之後，此細胞稱為Hfr （高頻率重組型）。Hfr是 F+的突變種，可使寄主基因轉移機率提高。 三、接合 3. 基因轉移的形式 a)  F+  F- ： 產生兩個F+，見下圖。 b)  Hfr  F- ：可能有一些基因是雙套(有接合到F-細胞 內)，有 一些是單套（沒有過來到F-，仍然在Hfr 內） 三、接合 4. 接合的應用 ：以時間順序來定基因圖 既然Hfr傳到F-是因為Hfr的基因解離傳遞到F-，因此以 “接合的時間點”可以知道傳了多少基因過去。（特定的基因 可以合成特定的蛋白質）。因此實驗中，每隔一段時間就測試 樣本，看樣本可以合成什麼樣的蛋白質，就可以知道Hfr大腸 菌的基因圖。（見下圖) 三、接合 5. 以接合定基因圖的缺點 ： a)基因傳遞的度相當快，很難準確定出順序 b)離傳遞起始愈近的基因，被傳遞的機率越高 ；反之， 離傳遞起始愈遠的基因，被傳遞的機率越低。 （因為中間的接合管常會無緣無故斷裂）。 三、接合 5. 以接合定基因圖的缺點 ： a)基因傳遞的度相當快，很難準確定出順序 b)離傳遞起始愈近的基因，被傳遞的機率越高 ；反之， 離傳遞起始愈遠的基因，被傳遞的機率越低。 （因為中間的接合管常會無緣無故斷裂）。 四、性導 F’ factor 1. 定義 ： F factor插入細菌染色體後，有時又會loop out，若 完整loop out仍稱為F factor，若帶有其他基因則稱為F’ factor. （見下圖） ’ 2.