32-酶的提取与分离纯化280.pptVIP

第三章 酶的提取与分离纯化 ★酶的提取基本概况 ★离心法酶的分离纯化; 2、沉淀分离（根据溶解度的不同）提取 特点:使溶液中的溶质由液相转变为固相析出 古老、实用、简单的初步分离方法 生物大分子制备中常用沉淀方法： 1 中性盐沉淀（盐析法） 2 有机溶剂沉淀 3 选择性沉淀（热变性和酸碱变性） 4 等电点沉淀 5 有机聚合物沉淀; 2.1 盐析沉淀法（改变离子强度） ①基本原理（盐溶和盐析）:向蛋白质或酶的水溶液中 加入中性盐，可产生两种现象： ●盐溶（salting in） ： 低浓度的中性盐增加蛋白质的溶解度。 ●盐析（salting out） ： 高浓度的中性盐降低蛋白质的溶解度。;蛋白质的盐析; 原因： 高盐浓度下盐离子与蛋白质分子争夺水分子，除去蛋白质的水合外壳，降低溶解度而沉淀。 不同蛋白质分子量、表面电荷不同，在不同盐浓度下沉淀，逐渐增大盐浓度，不同蛋白