免疫检测法及其应用课件教材教学课件.pptVIP

免疫酶技术及其应用——ELISA;酶联免疫法ELISA;免疫标记技术;免疫酶技术;基本原理;酶联免疫法ELISA;;实验材料;双抗原夹心法测抗体;间接法测定抗体;间接法的特点;竞争法测抗原;竞争法测抗原;竞争法测抗原;竞争法测抗体;捕获包被法测抗体;操作步骤如下;亲和素-生物素-ELISA法;3. 与固相抗原的竞争结合 取稀释板中预孵育的抗原抗体混合液100μl，加入酶标板的抗原孔中，放入37℃恒温培养箱中60 min。洗板3次。 ;实验材料： 羊抗人血清白蛋白抗体（一抗） 已知含量的人血清白蛋白（作标准曲线） 待检人血清白蛋白 辣根过氧化物酶标记的驴抗羊抗体（二抗） 包被液CBS：PH9.6，0.05mol/L碳酸盐缓冲液 洗板液或稀释液：PH7.4，0.01mol/L PBS 底物溶液：OPD-H2O2 终止液：2mol/L H2S04 酶标反应板（一条/人）;;实验前准备：;实验步骤：;实验操作：;;;三、操作步骤;抗原与抗体的预孵育 制作标准曲线： 在稀释板中，用PBS倍比稀释标准抗原，每种浓度的抗原最终为50μl，分别在各抗原孔中加入250μl一定浓度的抗体，放入37℃恒温培养箱中30 min。 待测抗原： 取50μl未知浓度的抗原按照同上操作。