〖医学〗遗传病的诊断教材教学课件.pptVIP

直接以基因作为检测对象,具有其他临床诊断方法所没有的特点: 针对性强、灵敏度高、特异性高、适应性强等。 1.基因诊断的特点 2.基因诊断的基本途径 2.1 直接诊断 直接检测致病基因本身的异常 2.2 间接诊断 多态性连锁分析 ① 选择要分析的基因座位 ② 确定应用的分析方法 ③ 选择合适的家系 ④ 对家系中的各个成员进行表型分析 ⑤ 分析、判断并解释得到的结果 3.基因诊断的方法 常用于基因诊断的方法有分子杂交、聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应－单链构象多态(PCR-SSCP)分析。 此外,近年来随着分子遗传学基础研究的发展,在DNA多态性连锁分析的临床诊断中,除了应用RFLP分析,还广泛应用了STR、SNP和DNA芯片技术。 3.1 分子杂交(molecular hybridization) 分子杂交是现代分子生物学技术的基础,是根据碱基互补配对原理,利用标记探针鉴定核酸序列中密切相关的分子方法。 在DNA、RNA和蛋白质不同水平常用相应的杂交方法有三种,即Southern印迹、Northern印迹和Western印迹。 A. Southern 印记杂交 原理:将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它