PCR分子诊断技术教材教学课件.pptxVIP

PCR分子诊断技术 王洋 2016.12.27内容PCR技术的概念及发展简史PCR反应的基本成分PCR基本原理和反应过程实时荧光定量PCR检测基本原理和方法PCR技术的应用、临床意义及发展趋向临床PCR检验的实验室管理PCR技术的概念及发展简史PCR概念 PCR的由来是Polymerase chain reaction的首个字母的组合，是聚合酶链式反应的简称，是一项体外扩增DNA序列的技术。PCR发展简史 ?1985年美国科学家Kary Mullis在Science杂志上发表了第一篇PCR的学术论文，从此PCR技术得到了生命科学界的认同，并与1993年获得了诺贝尔化学奖。 1 ?1988年saiki 从水生嗜热杆菌中提取到一种耐热DNA聚合酶，此酶能耐高温，在热变性中不会失活，从而解决了PCR操作技术中酶钝化为实际操作而带来的困扰，极好的提高了PCR的扩增效率，从此，此酶被命名为 Taq DNA聚合酶。 ?自PCR方法不断改进后，现PCR方法已衍生几十种之多，目前实时荧光定量PCR方法已被临床广泛应用，不仅可以用于定性检测而且可以确定原始样品含量。广泛应用于遗传学、微生物学乃至整个生命科学研究中，由于PCR方法有着极强的实用性，因此仍会被不断完善，进一步在生命科学研究中发挥更好的作用。PCR反应的基本成分?模板 是待扩增序列的核酸，包括基因组DNA、质粒DNA、噬菌体D